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簡單介紹:
蛋白質是生命功能的執(zhí)行者,其含量的變化在生物體的生長、環(huán)境應激、疾病發(fā)**展等過程中發(fā)揮著重要的作用。從DNA轉錄為mRNA再翻譯為蛋白質的過程中涉及到一整套精細的表達調控機制,如轉錄調控、轉錄后調控、翻譯調控、翻譯后調控等。相比較表達譜芯片和轉錄組測序而言,蛋白質組研究反映了蛋白質的表達水平,比從mRNA、miRNA水平推測目的蛋白的表達水平要直接的多,因為生物學功能終還是由蛋白質直接實現的。因此,同步檢測mRNA和蛋白質的表達量并進行聯合分析已成為生物學研究的必然趨勢。
詳情介紹:
蛋白質組學
,應用于蛋白質組學研究的技術主要有:熒光雙向差異電泳技術(2D-DIGE),同位素親和標簽技術(ICAT),細胞培養(yǎng)穩(wěn)定同位素技術(SILAC),可溶性聚合物同位素技術(SoPIL),同位素的相對和定量技術(iTRAQ)。其中,iTRAQ技術利用多種同位素試劑標記蛋白多肽N末端或賴氨酸側鏈基團,經高精度質譜儀串聯分析,可同時比較多達8種樣品之間的蛋白表達量,是應用廣泛的定量蛋白質組學技術。
蛋白質組分析(proteomics) 是對生物蛋白組(proteome) 的分析與檢測,蛋白組分析要將混合蛋白質分離, 分離的主要方法是蛋白雙向電泳。已被分離的蛋白質由質譜分析對其進行鑒定。
質譜檢測主要有三種方式:
1)基質輔助激光解析電離質譜技術(MALDI - TOF - MS )
2) 電噴霧電離串聯飛行時間質譜技術(ESI- TOF- MS)
3) 表面增強激光解析離子化-飛行時間質譜技術 (SELDI- TOF- MS)
前兩種技術分別針對高分子量蛋白質和低分子量蛋白質的檢測,第三種技術集蛋白質芯片和質譜于一身,具有靈敏度高,樣本要求低等特點,可同時檢測高分子量和低分子量蛋白質,被廣泛應用于惡性腫瘤標志物篩選的研究。