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產(chǎn)品詳情
簡單介紹：
iTRAQ( Isobaric Tag for Relative and Absolute Quantitation)和TMT( Tandem Mass Tag)分別是由AB EX和Thermofisher開發(fā)的、用于標記肽段并結(jié)合LC-MS實現(xiàn)對多個樣品的蛋白質(zhì)組進行相對定量的試劑盒。iTRAQ有4標和8標兩種規(guī)格，TMT有2標、6標和10標等三種規(guī)格。
詳情介紹：
iTRAQ
背景簡介：
iTRAQ和TMT的技術(shù)原理一樣，所不同的是二者的分子結(jié)構(gòu)有差異。與SILAC相比（標記蛋白質(zhì)），iTRAQ和TMT是對肽段進行標記的。依據(jù)iTRAQ/TMT標簽的質(zhì)量數(shù)差異，通過MS實現(xiàn)對多組樣品中的蛋白質(zhì)進行相對定量：
SILAC是通過MS( MSl)對蛋白質(zhì)進行定量，而iTRAQ/TMT是通過二級MS( MS/MS．MS2)進行定量的；
iTRAQ/TMT能兼容所有來源的蛋白質(zhì)樣品，并且能同時分析多達8-10組的樣品，分析通量高。
試驗流程
1、分別提取蛋白質(zhì)并定量；
2、Trypsin分別對蛋白進行酶解，提取肽段；
3、用不同質(zhì)量數(shù)的iTRAQ/TMT標簽分別對肽段樣品進行標記：
4、標記完成后，混合樣品，用SCX進行組分分離（15-20組分）；
5、對每個組分進行LC-MS分析：
6、蛋白質(zhì)鑒定與定量分析，篩選差異表達的蛋白；
7、生物學(xué)實驗驗證（Western blot，EUSA等）：
