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Real-time PCR
上海達(dá)為科生物Real-time PCR技術(shù)服務(wù),根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案(相對定量或定量;SYBR Green I或Taqman探針方法),用按照符合標(biāo)準(zhǔn)(MIQE)的real-time PCR試劑完成實(shí)驗(yàn),提供符合文章發(fā)表的客觀事實(shí)實(shí)驗(yàn)報(bào)告和原始數(shù)據(jù)。
操作流程:
1、客戶提供樣品及目的基因名稱及登錄號
2、我公司設(shè)計(jì)并合成引物及Taqman探針(探針法)
3、樣品的RNA提取及逆轉(zhuǎn)錄
4、熒光定量PCR檢測(3孔重復(fù))
5、提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)流程,條件,使用儀器及試劑,標(biāo)準(zhǔn)曲線,擴(kuò)增曲線,溶解曲線及原始Ct值
6、相對定量數(shù)據(jù)分析(ΔΔCt法)
服務(wù)要求:
細(xì)胞樣品:新鮮或加Trizol后-80℃保存,數(shù)量大于5×106個(gè);
組織樣品:-80℃保存,干冰運(yùn)輸,數(shù)量大于50mg;
血液:-80℃保存,體積大于300μl;
純化好的總RNA: OD260/OD280在1.9-2.1之間,完整性好;
總DNA(OD260/OD280在1.7-1.9之間,完整性好;
反轉(zhuǎn)錄好的cDNA:體積大于30μl(反轉(zhuǎn)錄的總RNA完整性好,純度在1.9-2.1之間);
提供待測基因序列或登錄號。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告部分組成:
原始數(shù)據(jù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線
熔解曲線
擴(kuò)增曲線