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冰凍切片
一、冰凍切片服務(wù)介紹
冰凍切片(frozen
section)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到硬度,然后進(jìn)行切片的方法。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡(jiǎn)便,而多應(yīng)用于手術(shù)中的快速病理診斷。冰凍切片的種類較多,有低溫恒冷箱冰凍切片法,二氧化碳冰凍切片法,甲醇循環(huán)制冷冰凍切片法等。
二、冰凍切片應(yīng)用
(1)在手術(shù)進(jìn)行中,突然發(fā)現(xiàn)病人的病變與原診斷,原定手術(shù)方案不相符合,或者懷疑時(shí),需要病理確定。
(2)了解**結(jié)內(nèi)是否有轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞,或者轉(zhuǎn)移的程度,以利于確定是否需要掃除**結(jié)或者其它的**措施。
(3)對(duì)于已確定為惡性腫瘤的患者,則需要了解其手術(shù)范圍是否足夠,上下切緣是否有殘存的腫瘤組織。
(4)在做剖腹探查時(shí)所發(fā)現(xiàn)的腫塊或者異樣的組織。
(5)顯示組織中的脂肪和脂類物質(zhì),這常見于某些病例如脂肪瘤及肉瘤,某些科研組織等。
(6)某些酶的顯示如ATP酶,琥珀酸脫氫酶等。
(7)神經(jīng)病理學(xué)技術(shù)中的某些染色法如:Eager氏法,Marchi氏法,Cajal氏法,Hortega氏法和Holzer氏法等。
(8)對(duì)某些物質(zhì)所進(jìn)行的免疫熒光的研究。
三、冰凍切片操作方法及步驟
①取材,未能固定的組織取材,不能太大太厚,厚者冰凍費(fèi)時(shí),大者難以切完整,好為24×24×2mm。
②取出組織支承器,放平擺好組織,周邊滴上包埋劑,速放于冷凍臺(tái)上,冰凍。小組織的應(yīng)先取一支承器,滴上包埋劑讓其冷凍,形成一個(gè)小臺(tái)后,再放上細(xì)小組織,滴上包埋劑。
③將冷凍好的組織塊,夾緊于切片機(jī)持承器上,啟動(dòng)粗進(jìn)退鍵,轉(zhuǎn)動(dòng)旋鈕,將組織修平。
④調(diào)好欲切的厚度,根據(jù)不同的組織而定,原則上是細(xì)胞密集的薄切,纖維多細(xì)胞稀的可稍為厚切,一般在5~10um間。
⑤調(diào)好防卷板。制作冰凍切片,關(guān)鍵在于防卷板的調(diào)節(jié)上,這就要求操作者要細(xì)心,準(zhǔn)確地將其調(diào)較好,調(diào)校至適當(dāng)?shù)奈恢谩G衅瑫r(shí),切出的切片能在時(shí)間順利地通過刀防卷板間的通道,平整地躺在持刀器的鐵板上。這時(shí)便可掀起防卷板,取一載玻片,將其附貼上即可。
⑥應(yīng)視不同的組織選擇不同的冷凍度。冷凍箱中冷凍度的高低,主要根據(jù)不同的組織而定,不能一概而論。如:切未經(jīng)固定的腦組織,肝組織和**結(jié)時(shí),冷凍箱中的溫度不能調(diào)太低,在-10- -15℃左右,切甲狀腺、脾、腎、肌肉等組織時(shí),可調(diào)在-15~20℃左右,切帶脂肪的組織時(shí),應(yīng)調(diào)至-25℃左右,切含大量的脂肪時(shí),應(yīng)調(diào)至-30℃。
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