智啟醫(yī)學(xué)新維度
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免疫組化檢測(cè)
一、服務(wù)介紹
用標(biāo)記的特異性抗體對(duì)組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中某些化學(xué)成分的分布和含量進(jìn)行組織和細(xì)胞的定性、定位或定量研究,這種技術(shù)稱(chēng)為免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry)技術(shù)或免疫細(xì)胞化學(xué)(immunocytochemistry)技術(shù)。免疫組化的特點(diǎn)是特異性強(qiáng)、定位準(zhǔn)確,因此能夠明確目的蛋白的細(xì)胞定位、亞細(xì)胞定位及多種蛋白之間的相互位置關(guān)系。免疫組化在醫(yī)學(xué)上應(yīng)用廣泛,尤其在臨床腫瘤診斷和鑒別診斷中具有普遍認(rèn)可的實(shí)用價(jià)值。其應(yīng)用于低分化或未分化腫瘤的鑒別診斷時(shí),準(zhǔn)確率可達(dá)50% -75%。
二、免疫組化實(shí)驗(yàn)原理
根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理,組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合,再利用一抗與標(biāo)記生物素、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng),后通過(guò)顯色反應(yīng)或熒光來(lái)顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分,在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。
三、實(shí)驗(yàn)流程
1. 石蠟切片的制作;
2. 石蠟切片的脫蠟與水化;
3. 阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性;
4. 抗原修復(fù);
5. 封閉非特異性蛋白;
6. 一抗孵育;
7. 具有生物素標(biāo)記的二抗孵育;
8. SP (鏈霉親和素-過(guò)氧化物酶)反應(yīng);
9. DAB顯色;
10. 復(fù)染、脫水、透明、封片。
11. 鏡檢,拍照。
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