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產(chǎn)品詳情
簡(jiǎn)單介紹:
細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn):上海達(dá)為科生物,主營(yíng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù),如想了解細(xì)胞周期檢測(cè)的更多內(nèi)容,歡迎來(lái)電咨詢(xún),我們將熱情為你服務(wù)!
詳情介紹:
原理
碘化丙啶(Propidium,簡(jiǎn)稱(chēng)PI)是一種雙鏈DNA的熒光染料。碘化丙啶和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光,并且熒光強(qiáng)度和雙鏈DNA的含量成正比。細(xì)胞內(nèi)的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞進(jìn)行DNA含量測(cè)定,然后根據(jù)DNA含量的分布情況,可以進(jìn)行細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡分析。
碘化丙啶染色后,假設(shè)G0/G1期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1,那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度的理論值為2,正在進(jìn)行DNA復(fù)制的S期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1-2之間。凋亡細(xì)胞由于細(xì)胞核發(fā)生濃縮以及發(fā)生DNA片段化(DNA
fragmentation)導(dǎo)致部分基因組DNA片斷在染色過(guò)程中丟失,因此凋亡細(xì)胞碘化丙啶染色后呈現(xiàn)明顯的弱染,即熒光強(qiáng)度小于1,在流式檢測(cè)的熒光圖上出現(xiàn)所謂的sub-G1峰,即凋亡細(xì)胞峰。
服務(wù)流程
- 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備
- 碘化丙啶染色液的配制
- 染色
- 流式檢測(cè)和分析:用流式細(xì)胞儀在激發(fā)波長(zhǎng)488nm波長(zhǎng)處檢測(cè)紅色熒光,同時(shí)檢測(cè)光散射情況。采用適當(dāng)分析軟件進(jìn)行細(xì)胞DNA含量分析和光散射分析