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活性氧(reactive oxygen species, ROS)是生物體內(nèi)一些氧化反應(yīng)中形成的氧自由基，常見有超氧化陰離子(O2－)，過(guò)氧化氫(H2O2)，過(guò)氧化自由基(ROO－)和氫氧自由基(OH－)等形式。自由基外層具有非配對(duì)電子，其化學(xué)性質(zhì)非常活潑，它既是電子供體，又是電子受體?；钚匝跏巧顒?dòng)中不可缺少的活性物質(zhì)。自由基在體內(nèi)可提高一些酶的活性，如核苷酸的合成和肝臟的**過(guò)程中，自由基可激活某些合成酶或**酶。自由基還參與機(jī)體內(nèi)一些活性物質(zhì)如前列腺素的合成。炎癥過(guò)程中，自由基可促進(jìn)炎性細(xì)胞吞噬**和殺死**，如中性粒細(xì)胞發(fā)生呼吸爆發(fā)時(shí)產(chǎn)生大量自由基，可殺死病原體。
ROS更多被賦予明確的病理意義。ROS可對(duì)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)、核酸和蛋白分子產(chǎn)生氧化作用，引起其結(jié)構(gòu)和功能障礙。ROS增多導(dǎo)致機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)(Oxidative Stress)造成細(xì)胞損傷，參與多種病理機(jī)制。百種以上的疾病狀態(tài)都可能有ROS的參與。機(jī)體通過(guò)一系列抗氧化機(jī)制，維持ROS的平衡，如超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、過(guò)氧化氫酶(Catalase)等酶類和一些小分子還原物質(zhì)，可去除細(xì)胞生成的ROS。檢測(cè)細(xì)胞ROS的含量，可以了解ROS在細(xì)胞一些生理和病理狀態(tài)中的變化，分析藥物效應(yīng)和相關(guān)機(jī)制。
ROS檢測(cè)原理：活性氧檢測(cè)時(shí)會(huì)利用熒光探針DCFH-DA。DCFH-DA本身沒有熒光，可以自由穿過(guò)細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后，可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細(xì)胞膜，從而使探針很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧可以氧化無(wú)熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測(cè)DCF的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。
