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產(chǎn)品詳情
簡單介紹:
細胞增殖是活細胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征 ,是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。細胞增殖是指細胞在周期調(diào)控的因子下,通過DNA復制等反應(yīng),完成細胞分裂的過程。增殖檢測一般是分析分裂中的細胞數(shù)量的變化,進而反應(yīng)細胞的生長狀態(tài)及活性,細胞增殖檢測主要分為四類:DNA合成檢測、代謝活性檢測、細胞增殖相關(guān)抗原檢測和ATP濃度檢測。
細胞活性是判斷體外培養(yǎng)細胞在某些條件下是否能正常生長的重要指標,如藥物處理、放射性或紫外線照射、培養(yǎng)條件變化等。細胞活性檢測指標通常包括細胞膜對核酸染料的通透性、代謝活性、膜電位等。
細胞活性的檢測相當于細胞增殖能力的測定,采用特殊的試劑測定細胞的代謝活力或細胞代謝產(chǎn)物,通過檢測細胞的氧化還原活性反映細胞增殖能力,屬于間接檢測細胞增殖能力的方法。
細胞增殖的研究方法有很多,主要包括:MTT、MTS、CCK8、Edu等,其中EdU檢測方
詳情介紹:
Edu染色是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替T滲入正在復制的DNA分子,通過基于EdU與Apollo®熒光染料 的特異性反應(yīng)檢測DNA復制活性,通過檢測EdU標記便能準確地反映細胞的增殖情況。EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU檢測染料在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解 、熱解 、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在體外細胞和體內(nèi)組織水平能更準確地反映細胞增殖等現(xiàn)象。
Edu染色注意事項
1 、鋪板
細胞數(shù)量:在前期細胞培養(yǎng)中,觀察細胞貼壁率、貼壁后面積大小、倍
增時間;以確保處理過程中不會細胞過滿(鋪板太密或長太久,細胞都會擠死掉的?。?,準確呈現(xiàn)處理因素與細胞數(shù)的關(guān)系(5×103 ~10×103 )。意思就是先了解下你需要檢測的細胞,做個預實驗先。
2、避免血清的干擾
用含胎牛血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞時,高濃度血清物質(zhì)(我也會吸光噠?。绊懺囼灴椎奈舛戎?,降低實驗敏感度。
3、防止邊緣效應(yīng)及復孔設(shè)置
應(yīng)在96孔板邊緣滴加PBS(別省那點板子啊?。?,邊緣孔的水分揮發(fā)較快,藥物易被濃縮,對實驗影響很大大。復孔,做3-5個,推薦5個