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產(chǎn)品詳情
簡單介紹：
免疫共沉淀：蛋白間相互作用是細胞各種基本功能的主要完成者，參與幾乎所有的重要生命活動。因此，蛋白-蛋白相互作用研究以及建立相互作用的關(guān)系網(wǎng)絡(luò)圖，具有十分重要的意義，也是目前蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域的熱點。
詳情介紹：
免疫共沉淀實驗原理：
以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法，是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。
當細胞在非變性條件下被裂解時，完整細胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X，那么與X在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)Y也能沉淀下來。
免疫共沉淀實驗優(yōu)勢：
a) 取材可以選擇該目的蛋白所在物種、特定組織、細胞，因此CoIP能夠反應(yīng)該蛋白在天然組織細胞狀態(tài)下存在的互作關(guān)系蛋白；
b) 找出整個復(fù)合體中直接/間接互作的多個蛋白，研究復(fù)合體組成；
c) 通過與質(zhì)譜鑒定連用可以初篩到一系列未知蛋白，再通過其他技術(shù)進一步驗證。
免疫共沉淀實驗注意事項
a)需要特異性IP級別誘餌蛋白抗體（重點）；
b)如果沒有特異性抗體，則需要考慮構(gòu)建重組標簽質(zhì)粒，用標簽抗體進行CoIP實驗；
c)樣品種類實驗風(fēng)險：過表達細胞樣品<細胞樣品<動物組織樣品<植物樣品（通常為轉(zhuǎn)基因植物，標簽抗體也很難達到特異性富集）；
d)CoIP-MS風(fēng)險：由于存在特異性抗體高豐度蛋白，質(zhì)譜不一定能夠鑒定到誘餌蛋白。
