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產(chǎn)品詳情
簡單介紹:
HOECHST染色實(shí)驗(yàn)Hoechst 33342 Staining Dye Solution 是一種用于在熒光顯微鏡下標(biāo)記 DNA 的熒光染料。 該產(chǎn)品可用于熒光顯微鏡、微孔板、比色皿和流式細(xì)胞儀應(yīng)用。 它還可用于通過繪制標(biāo)準(zhǔn)排放-含量曲線來檢測樣本 DNA 的含量。
詳情介紹:
HOECHST染色實(shí)驗(yàn)步驟
1. 將熒光染料(Hoechst 33342、AO、PI 或 EB)以合適濃度直接添加到細(xì)胞培養(yǎng)基中。
2. 將細(xì)胞孵育 5 分鐘。
3. 在倒置熒光顯微鏡下直接觀察細(xì)胞。
如果需要,在對轉(zhuǎn)染細(xì)胞進(jìn)行重要染色后修復(fù)細(xì)胞,以進(jìn)一步詳細(xì)分析形態(tài):
1.用PBS清洗細(xì)胞(此步驟可省略),然后用4%(w/v)多聚jia醛或1%(v/v)戊er醛室溫固定細(xì)胞5分鐘。
2. 用 PBS 清洗細(xì)胞。
3. 將樣品用 PermaFluor 水性封固劑封固,并在配備適當(dāng)濾光片的熒光顯微鏡下檢查細(xì)胞。
洗滌應(yīng)盡可能輕柔,以盡量減少死細(xì)胞的損失。
HOECHST染色實(shí)驗(yàn) 激發(fā)/發(fā)射光譜
當(dāng)與 dsDNA 結(jié)合時,Hoechst 33342 在紫外范圍 (350 nm) 內(nèi)具有zui大激發(fā)波長,并且染料可以在zui大發(fā)射波長 461 nm 的藍(lán)色通道中被zui佳檢測(圖 2)。 Hoechst 33342 在激發(fā)和發(fā)射波長之間具有特征性的寬斯托克斯位移,當(dāng)需要良好的光譜分離以減少熒光干擾時,例如在免疫熒光顯微鏡的染色質(zhì)復(fù)染中,這種染料是zui佳選擇。