1、冷凍切片原理

冷凍切片是指將組織在冷凍狀態(tài)下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑，將組織進行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經(jīng)過任何化學(xué)藥品處理或加熱過程，大大縮短了制片時間。同時，由于此法不需要經(jīng)過脫水、透明和浸蠟等步驟，因而較適合于脂肪、神經(jīng)組織和一些組織化學(xué)的制片，并作為快速切片的方法應(yīng)用在臨床診斷。

2、產(chǎn)品特點及種類

1. 快速制備：能夠在短時間內(nèi)完成切片制作，為臨床診斷和研究提供及時的結(jié)果。通常幾分鐘內(nèi)即可獲得切片。
2. 保持組織形態(tài)：較好地保留組織的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和形態(tài)，有助于準(zhǔn)確觀察和分析。
3. 適用于多種組織：可用于新鮮組織、手術(shù)切除標(biāo)本等多種類型的生物樣本。
4. 冰凍切片的種類較多，有低溫恒冷箱冰凍切片法，二氧化碳冰凍切片法，甲醇循環(huán)制冷冰凍切片法等。
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3、應(yīng)用領(lǐng)域

1. 在手術(shù)進行中，突然發(fā)現(xiàn)病人的病變與原診斷，原定手術(shù)方案不相符合，或者懷疑時，需要病理確定。
2. 了解**結(jié)內(nèi)是否有轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞，或者轉(zhuǎn)移的程度，以利于確定是否需要掃除**結(jié)或者其它的**措施。
3. 對于已確定為惡性腫瘤的患者，則需要了解其手術(shù)范圍是否足夠，上下切緣是否有殘存的腫瘤組織。
4. 在做剖腹探查時所發(fā)現(xiàn)的腫塊或者異樣的組織。
5. 顯示組織中的脂肪和脂類物質(zhì)，這常見于某些病例如脂肪瘤及肉瘤，某些科研組織等。
6. 某些酶的顯示如ATP酶，琥珀酸脫氫酶等。
7. 神經(jīng)病理學(xué)技術(shù)中的某些染色法如：Eager氏法，Marchi氏法，Cajal氏法，Hortega氏法和Holzer氏法等。
8. 對某些物質(zhì)所進行的免疫熒光的研究。

4、冷凍切片的操作方法和步驟

1. 取材，未能固定的組織取材，不能太大太厚，厚者冰凍費時，大者難以切完整，好為24×24×2mm。
2. 取出組織支承器，放平擺好組織，周邊滴上包埋劑，速放于冷凍臺上，冰凍。小組織的應(yīng)先取一支承器，滴上包埋劑讓其冷凍，形成一個小臺后，再放上細(xì)小組織，滴上包埋劑。
3. 將冷凍好的組織塊，夾緊于切片機持承器上，啟動粗進退鍵，轉(zhuǎn)動旋鈕，將組織修平。
4. 調(diào)好欲切的厚度，根據(jù)不同的組織而定，原則上是細(xì)胞密集的薄切，纖維多細(xì)胞稀的可稍為厚切，一般在5～10um間。
5. 調(diào)好防卷板。制作冰凍切片，關(guān)鍵在于防卷板的調(diào)節(jié)上，這就要求操作者要細(xì)心，準(zhǔn)確地將其調(diào)較好，調(diào)校至適當(dāng)?shù)奈恢?。切片時，切出的切片能在時間順利地通過刀防卷板間的通道，平整地躺在持刀器的鐵板上。這時便可掀起防卷板，取一載玻片，將其附貼上即可。
6. 應(yīng)視不同的組織選擇不同的冷凍度。冷凍箱中冷凍度的高低，主要根據(jù)不同的組織而定，不能一概而論。如：切未經(jīng)固定的腦組織，肝組織和**結(jié)時，冷凍箱中的溫度不能調(diào)太低，在-10- -15℃左右，切甲狀腺、脾、腎、肌肉等組織時，可調(diào)在-15～20℃左右，切帶脂肪的組織時，應(yīng)調(diào)至-25℃左右，切含大量的脂肪時，應(yīng)調(diào)至-30℃。

5、注意事項

1. 樣本質(zhì)量：確保樣本新鮮、無損傷，以獲得高質(zhì)量的切片。

2. 操作規(guī)范：嚴(yán)格按照操作規(guī)程使用冷凍切片機，避免因操作不當(dāng)導(dǎo)致切片質(zhì)量下降或設(shè)備損壞。

3. 儲存條件：切片制作完成后，應(yīng)妥善保存，避免受潮、污染等。

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