Western Blot（WB）通?？梢灾?/span>蛋白質(zhì)印跡法，這是一種廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫學(xué)等領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。

一、基本原理

Western Blot 通過電泳將蛋白質(zhì)分離，然后將分離后的蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相載體（如硝酸纖維素膜或 PVDF 膜）上。接著，利用特異性抗體與目的蛋白結(jié)合，再通過標(biāo)記的二抗進(jìn)行檢測，以確定目的蛋白的存在、大小和相對豐度。

二、主要步驟

1. 樣品制備：提取含有目標(biāo)蛋白的組織或細(xì)胞樣品，進(jìn)行裂解、勻漿等處理，制備成蛋白質(zhì)溶液。

2. 電泳分離：將蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行 SDS-PAGE（十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳），根據(jù)蛋白質(zhì)的分子量大小進(jìn)行分離。

3. 轉(zhuǎn)膜：將凝膠中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上，常用的轉(zhuǎn)膜方法有濕轉(zhuǎn)和半干轉(zhuǎn)。

4. 封閉：用封閉液封閉膜上的非特異性結(jié)合位點(diǎn)，以減少背景干擾。

5. 一抗孵育：加入特異性一抗，與目的蛋白結(jié)合。

6. 二抗孵育：加入標(biāo)記的二抗，與一抗結(jié)合，用于檢測目的蛋白。

7. 檢測：通過顯色或發(fā)光等方法檢測目的蛋白的信號。

三、應(yīng)用領(lǐng)域

1. 蛋白質(zhì)表達(dá)分析：檢測特定蛋白質(zhì)在不同組織、細(xì)胞或不同處理?xiàng)l件下的表達(dá)水平變化。

2. 蛋白質(zhì)定位研究：確定蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的定位。

3. 蛋白質(zhì)相互作用研究：通過共免疫沉淀結(jié)合 Western Blot 檢測蛋白質(zhì)之間的相互作用。

4. 疾病診斷和研究：在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，用于檢測疾病相關(guān)蛋白質(zhì)的表達(dá)變化，為疾病的診斷和研究提供依據(jù)。

四、實(shí)驗(yàn)服務(wù)

分子實(shí)驗(yàn)平臺：高效運(yùn)作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構(gòu)建、流式細(xì)胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實(shí)驗(yàn)。

基因組學(xué)平臺：可以完成甲基化檢測、基因芯片分析、高通量測序等實(shí)驗(yàn)。

蛋白組學(xué)平臺：能實(shí)現(xiàn)LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。

病理學(xué)平臺：涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實(shí)驗(yàn)。

生物信息學(xué)分析：文本挖掘，芯片表達(dá)譜分析，序列分析，轉(zhuǎn)錄因子靶點(diǎn)預(yù)測，高通量測序數(shù)據(jù)分析等項(xiàng)目

臨床前CRO服務(wù)：主要提供呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)性疾病的藥效學(xué)評價服務(wù)，包括靶點(diǎn)驗(yàn)證、體內(nèi)外模型的構(gòu)建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評價、藥代動力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內(nèi)制劑研發(fā)等。

項(xiàng)目轉(zhuǎn)化服務(wù)：助力客戶進(jìn)行方案設(shè)計(jì)、聯(lián)合課題申報、藥物項(xiàng)目引進(jìn)和孵化，解決客戶對實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺、專業(yè)人才、zhuanli申請和融資的需求；

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