智啟醫(yī)學(xué)新維度
服務(wù)電話： 180-1784-7121（微信同號(hào)）
一、基本原理
利用抗體與目標(biāo)蛋白的特異性結(jié)合，將目標(biāo)蛋白從復(fù)雜的混合物中沉淀出來(lái)。通常將抗體與固相載體（如 Protein A/G 珠子）結(jié)合，然后加入含有目標(biāo)蛋白的樣品，抗體與目標(biāo)蛋白結(jié)合形成免疫復(fù)合物，通過(guò)離心等方法將免疫復(fù)合物沉淀下來(lái)，從而分離出目標(biāo)蛋白。
二、主要步驟
1. 抗體與固相載體結(jié)合：將特異性抗體與 Protein A/G 珠子等固相載體在適當(dāng)?shù)木彌_液中孵育，使抗體結(jié)合到固相載體上。
2. 樣品處理：準(zhǔn)備含有目標(biāo)蛋白的樣品，如細(xì)胞裂解液等?？梢詫?duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，如去除雜質(zhì)、調(diào)整濃度等。
3. 免疫沉淀反應(yīng)：將結(jié)合了抗體的固相載體加入樣品中，在適當(dāng)?shù)臈l件下孵育，使抗體與目標(biāo)蛋白結(jié)合形成免疫復(fù)合物。
4. 洗滌：通過(guò)離心等方法收集免疫復(fù)合物，然后用洗滌緩沖液多次洗滌，去除非特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。
5. 洗脫：用適當(dāng)?shù)南疵撘簩⒛繕?biāo)蛋白從免疫復(fù)合物中洗脫下來(lái)，得到純化的目標(biāo)蛋白。
6. 分析：可以通過(guò) Western Blot、質(zhì)譜等方法對(duì)洗脫下來(lái)的目標(biāo)蛋白進(jìn)行分析和鑒定。
三、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
1. 抗體選擇：選擇特異性高、親和力強(qiáng)的抗體是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵?？梢酝ㄟ^(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定抗體的有效性。
2. 樣品準(zhǔn)備：樣品的處理要恰當(dāng)，避免蛋白質(zhì)降解和非特異性結(jié)合?？梢愿鶕?jù)需要加入蛋白酶抑制劑、調(diào)整離子強(qiáng)度等。
3. 對(duì)照設(shè)置：設(shè)置合適的對(duì)照實(shí)驗(yàn)，如使用正常 IgG 作為陰性對(duì)照，以驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的特異性。
4. 洗滌條件：洗滌要充分，但不能過(guò)于劇烈，以免損失目標(biāo)蛋白或破壞免疫復(fù)合物。
5. 洗脫條件：選擇合適的洗脫液和洗脫方法，確保目標(biāo)蛋白能夠有效地從免疫復(fù)合物中洗脫下來(lái)，同時(shí)盡量減少非特異性洗脫。
四、達(dá)為科實(shí)驗(yàn)服務(wù)
分子實(shí)驗(yàn)平臺(tái)：高效運(yùn)作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構(gòu)建、流式細(xì)胞儀檢測(cè)、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定、外泌體抽提及鑒定等實(shí)驗(yàn)。
基因組學(xué)平臺(tái)：可以完成甲基化檢測(cè)、基因芯片分析、高通量測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。
蛋白組學(xué)平臺(tái)：能實(shí)現(xiàn)LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。
病理學(xué)平臺(tái)：涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實(shí)驗(yàn)。
生物信息學(xué)分析：文本挖掘，芯片表達(dá)譜分析，序列分析，轉(zhuǎn)錄因子靶點(diǎn)預(yù)測(cè)，高通量測(cè)序數(shù)據(jù)分析等項(xiàng)目
臨床前CRO服務(wù)：主要提供呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)性疾病的藥效學(xué)評(píng)價(jià)服務(wù)，包括靶點(diǎn)驗(yàn)證、體內(nèi)外模型的構(gòu)建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評(píng)價(jià)、藥代動(dòng)力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內(nèi)制劑研發(fā)等。
項(xiàng)目轉(zhuǎn)化服務(wù)：助力客戶進(jìn)行方案設(shè)計(jì)、聯(lián)合課題申報(bào)、藥物項(xiàng)目引進(jìn)和孵化，解決客戶對(duì)實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)、專業(yè)人才、zhuanli申請(qǐng)和融資的需求；
如果您對(duì)我們的服務(wù)內(nèi)容感興趣或有疑問(wèn)，你可以通過(guò)網(wǎng)頁(yè)咨詢我們的在線客服，或致電：18815516593，我們將熱情為您服務(wù)。
