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Von Kossa 染色是一種用于檢測(cè)組織中鈣鹽沉積的特殊染色方法。
一、基本原理
該染色方法基于銀離子與組織中的鈣鹽結(jié)合,在光照下被還原為金屬銀,從而使鈣鹽沉積的部位呈現(xiàn)出黑色或棕黑色。
二、主要步驟
1. 脫蠟至水:二甲苯Ⅰ5分鐘,二甲苯Ⅱ5分鐘,二甲苯Ⅲ5分鐘,無水乙醇1分鐘,95%乙醇1分鐘,75%乙醇1分鐘,蒸餾水洗1分鐘。
2. 切片入Von Kossa銀溶液強(qiáng)光照射15-60min。蒸餾水洗1min。
3. 入海波溶液處理2min。
4. (可選)HE染色液或Van Gieson復(fù)染細(xì)胞。
5. 95%乙醇、無水乙醇脫水,二甲苯或浸蠟脫蠟透明液透明、中性樹膠封固。
三、應(yīng)用領(lǐng)域
1. 骨組織研究:用于檢測(cè)骨組織中的鈣鹽沉積情況,評(píng)估骨骼的發(fā)育、代謝和疾病狀態(tài)。
2. 病理學(xué)研究:在一些病理情況下,如鈣化性疾病、腫瘤等,組織中可能出現(xiàn)異常的鈣鹽沉積。Von Kossa 染色可以幫助病理學(xué)家識(shí)別這些病變。
3. 細(xì)胞生物學(xué)研究:用于研究細(xì)胞培養(yǎng)中的鈣鹽沉積現(xiàn)象,了解細(xì)胞的生理和病理過程。
四、注意事項(xiàng)
1. 硝酸銀溶液具有一定的毒性和腐蝕性,操作時(shí)要注意**,避免接觸皮膚和眼睛。
2. 光照時(shí)間要適當(dāng)控制,過長(zhǎng)或過短的光照時(shí)間都可能影響染色效果。
3. 染色過程中要注意避免污染,保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔。
4. 不同組織和樣本的染色條件可能需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整,以獲得*佳的染色效果。
五、達(dá)為科實(shí)驗(yàn)服務(wù)
分子實(shí)驗(yàn)平臺(tái):高效運(yùn)作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構(gòu)建、流式細(xì)胞儀檢測(cè)、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定、外泌體抽提及鑒定等實(shí)驗(yàn)。
基因組學(xué)平臺(tái):可以完成甲基化檢測(cè)、基因芯片分析、高通量測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。
蛋白組學(xué)平臺(tái):能實(shí)現(xiàn)LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。
病理學(xué)平臺(tái):涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實(shí)驗(yàn)。
生物信息學(xué)分析:文本挖掘,芯片表達(dá)譜分析,序列分析,轉(zhuǎn)錄因子靶點(diǎn)預(yù)測(cè),高通量測(cè)序數(shù)據(jù)分析等項(xiàng)目
臨床前CRO服務(wù):主要提供呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)性疾病的藥效學(xué)評(píng)價(jià)服務(wù),包括靶點(diǎn)驗(yàn)證、體內(nèi)外模型的構(gòu)建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評(píng)價(jià)、藥代動(dòng)力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內(nèi)制劑研發(fā)等。
項(xiàng)目轉(zhuǎn)化服務(wù):助力客戶進(jìn)行方案設(shè)計(jì)、聯(lián)合課題申報(bào)、藥物項(xiàng)目引進(jìn)和孵化,解決客戶對(duì)實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)、專業(yè)人才、zhuanli申請(qǐng)和融資的需求;
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