智啟醫(yī)學(xué)新維度
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蛋白質(zhì)**定量是確定樣品中特定蛋白質(zhì)準(zhǔn)確含量的方法。
一、常用方法
1. 同位素標(biāo)記法
- 如利用穩(wěn)定同位素標(biāo)記的氨基酸（如 SILAC）摻入細(xì)胞培養(yǎng)中，通過比較標(biāo)記與未標(biāo)記樣品中蛋白質(zhì)的信號(hào)強(qiáng)度比例來確定**量。
- 或者使用同位素標(biāo)記的內(nèi)標(biāo)肽段在質(zhì)譜分析中進(jìn)行定量。
2. **定量蛋白質(zhì)組學(xué)（AQUA）
- 合成含有穩(wěn)定同位素標(biāo)記的特定肽段作為內(nèi)標(biāo)，與樣品一起進(jìn)行質(zhì)譜分析，根據(jù)內(nèi)標(biāo)肽段和目標(biāo)肽段的信號(hào)強(qiáng)度比來確定蛋白質(zhì)的**量。
二、應(yīng)用領(lǐng)域
1. 生物醫(yī)學(xué)研究
- 研究疾病發(fā)**展過程中特定蛋白質(zhì)的變化，有助于了解疾病機(jī)制。
- 藥物研發(fā)中，確定藥物作用靶點(diǎn)的蛋白質(zhì)含量變化。
2. 生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)
- 蛋白質(zhì)藥物的質(zhì)量控制，確保藥物中有效成分的準(zhǔn)確含量。
- 工業(yè)酶制劑的生產(chǎn)中，監(jiān)控酶蛋白的產(chǎn)量。
舉例：經(jīng)典的蛋白質(zhì)**定量主要依賴于抗體和重組蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品，例如ELISA。研究人員利用串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行多蛋白質(zhì)同時(shí)**定量的新方法-MRM/PRM。 MRM/PRM是質(zhì)譜技術(shù)的一種擴(kuò)展，用于對(duì)特定的蛋白質(zhì)或肽進(jìn)行高靈敏度和高選擇性的定量分析。特別適合于生物樣本中低豐度蛋白質(zhì)的檢測(cè)。這種方法在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中具有重要意義，尤其是在尋找生物標(biāo)志物和研究疾病機(jī)制方面。
血液中6種蛋白質(zhì)同時(shí)進(jìn)行MRM分析
