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移植性腫瘤模型是將腫瘤細(xì)胞或組織移植到實驗動物體內(nèi)建立的腫瘤模型。
一、類型
1. 同種移植模型
- 將同一物種的腫瘤細(xì)胞或組織移植到同種動物體內(nèi)。
- 例如,將小鼠的腫瘤細(xì)胞移植到其他小鼠體內(nèi)。
- 優(yōu)點是遺傳背景相似,免疫排斥反應(yīng)相對較弱。
2. 異種移植模型
- 將不同物種的腫瘤細(xì)胞或組織移植到實驗動物體內(nèi)。
- 常用的是將人類腫瘤細(xì)胞移植到免疫缺陷動物(如裸鼠、SCID 小鼠等)體內(nèi)。
- 能更好地模擬人類腫瘤的生物學(xué)特性,但可能存在物種差異。
二、建立方法
1. 細(xì)胞移植
- 體外培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液注射到實驗動物體內(nèi)。
- 可通過皮下注射、腹腔注射、靜脈注射等方式進(jìn)行。
2. 組織塊移植
- 將新鮮的腫瘤組織切成小塊,移植到實驗動物體內(nèi)。
- 通常采用皮下移植或原位移植(將腫瘤組織移植到與人類腫瘤發(fā)生部位相似的動物器官中)。
三、應(yīng)用
1. 藥物篩選
- 測試抗腫瘤藥物的療效和毒性。
- 可快速評估大量藥物,為臨床**提供參考。
2. 機(jī)制研究
- 研究腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移機(jī)制以及腫瘤與宿主的相互作用。
3. **方法評估
- 評估放療、化療、免疫**等不同**手段的效果。
四、優(yōu)點
1. 腫瘤發(fā)生率高
- 由于是人為移植腫瘤細(xì)胞或組織,腫瘤發(fā)生率相對較高。
2. 生長速度相對穩(wěn)定
- 便于觀察和測量腫瘤的生長情況。
3. 可重復(fù)性好
- 實驗條件相對可控,結(jié)果的可重復(fù)性較高。
五、局限性
1. 與人類腫瘤存在差異
- 雖然異種移植模型能在一定程度上模擬人類腫瘤,但仍存在物種差異。
2. 免疫缺陷動物的使用
- 異種移植模型通常需要使用免疫缺陷動物,可能無法完全反映正常免疫狀態(tài)下的腫瘤發(fā)展。
總之,移植性腫瘤模型在腫瘤研究中具有重要價值,但在使用時需要充分考慮其優(yōu)缺點,結(jié)合其他模型和方法進(jìn)行綜合研究。
六、細(xì)胞移植皮下注射具體步驟
首先準(zhǔn)備好要移植的腫瘤細(xì)胞(細(xì)胞量根據(jù)不同腫瘤略有不同,我們所用的前列腺癌細(xì)胞系每個移植點一般選擇 1x106 左右;腫瘤細(xì)胞可與基質(zhì)膠 1:1 混勻后用 1 ml 注射器吸取,基質(zhì)膠能夠給腫瘤細(xì)胞提供營養(yǎng)環(huán)境,有助于腫瘤細(xì)胞生長)。
戴無菌手套后,將小鼠用左手大拇指和食指捏住頸部皮膚,然后將鼠尾用左手無名指和小指固定于左手大魚際。將腋窩或腹股溝用 75% 酒精消毒 3 次。右手持吸有腫瘤細(xì)胞和基質(zhì)膠混合液的注射器,在腹股溝或腋窩的位置,45°斜角進(jìn)針,注意不要突破腹膜,將針頭保持于皮下位置。
然后近水平位置將針頭幾乎wan全插入皮下,將混有基質(zhì)膠的腫瘤細(xì)胞注射入皮下(腫瘤細(xì)胞量約 1x106),快速退針,左手食指輕壓針孔約 1 min 后將小鼠放回飼養(yǎng)籠中,注意將小鼠側(cè)放于墊料上,放置其不適嘔吐時嘔吐物誤入呼吸道引起窒息。2~3 h 后觀察小鼠是否蘇醒。
如果是利用腫瘤組織(人體腫瘤標(biāo)本或小鼠移植瘤傳代)建立裸鼠皮下移植瘤模型,則需要首先將腫瘤組織用無菌 PBS(或 1640 培養(yǎng)基)洗滌 3 次,然后在無菌平皿上切成或用無菌剪刀剪成<1 mm3 體積的小塊(種植前可裹基質(zhì)膠)備用。
將小鼠用水he氯醛麻醉后平臥于解剖板上,四肢用膠帶固定,將腋窩或腹股溝用 75% 酒精消毒 3 次,然后用眼科剪剪開約 0.5 cm 小口,小鑷子將皮下筋膜與皮膚分開,然后將腫瘤組織放入貼近腹股溝或腋窩的深部,每個位置放置 2~3 塊腫瘤組織,注意不同組間統(tǒng)一放置腫瘤組織塊數(shù)以保持一致。
然后縫合皮膚,消毒后將小鼠側(cè)臥位放置于飼養(yǎng)籠的墊料上。2~3 h 后觀察小鼠是否蘇醒。
達(dá)為科實驗服務(wù)
分子實驗平臺:高效運(yùn)作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構(gòu)建、流式細(xì)胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實驗、酶聯(lián)免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實驗。
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