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一、構(gòu)建方法
1. 單側(cè)輸尿管梗阻（UUO）模型
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1. 麻醉6-8周齡的C57BL/6小鼠。
2. 腹部剃毛備皮。
3. 打開腹腔，撥開腸管，確定右側(cè)輸尿管。
4. 在UUO模型中，在右輸尿管的兩個點結(jié)扎，并在它們之間切開。
5. 在UUO模型后的14天處死小鼠,取材。
2. 藥物誘導(dǎo)模型- 給予小鼠特定的藥物，如阿霉素、馬兜鈴酸等，可引起腎臟損傷并逐漸發(fā)展為腎纖維化。
- 阿霉素可通過尾靜脈注射，一定時間后出現(xiàn)腎小球硬化和腎間質(zhì)纖維化。馬兜鈴酸可通過灌胃等方式給予。
3. 基因改造模型
- 通過基因工程技術(shù)，敲除或過表達特定基因，使小鼠易患腎纖維化。
- 例如，敲除與纖維化抑制相關(guān)的基因或過表達促纖維化基因。
二、病理特征
1. 腎臟形態(tài)改變
- 腎臟體積增大或縮小，表面粗糙，顏色蒼白。
- 嚴重時可出現(xiàn)腎臟萎縮。
2. 組織學變化
- 腎小球硬化：腎小球基底膜增厚，系膜細胞增生，****袢塌陷。
- 腎間質(zhì)纖維化：間質(zhì)中膠原纖維沉積增多，成纖維細胞活化增生，腎小管萎縮、擴張。
- 炎癥細胞浸潤：主要有巨噬細胞、**細胞等。
三、應(yīng)用
1. 發(fā)病機制研究
- 探討腎臟纖維化過程中的細胞信號通路、分子機制。
- 如 TGF-β/Smad 信號通路、Wnt/β-catenin 信號通路等在腎纖維化中的作用。
2. 藥物研發(fā)和篩選
- 測試新的抗纖維化藥物的療效和**性。
- 評估中藥、小分子化合物等對腎纖維化的**作用。
3. **方法探索
- 研究基因**、干細胞**等新的**策略對腎纖維化的干預(yù)效果。
總之，小鼠腎纖維化模型為深入研究腎臟纖維化提供了重要的實驗平臺，但不同模型各有優(yōu)缺點，應(yīng)根據(jù)研究目的選擇合適的模型。
達為科實驗服務(wù)
分子實驗平臺：高效運作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構(gòu)建、流式細胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實驗、酶聯(lián)免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實驗。
基因組學平臺：可以完成甲基化檢測、基因芯片分析、高通量測序等實驗。
蛋白組學平臺：能實現(xiàn)LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點實驗項目。
病理學平臺：涉及免疫熒光染色、免疫組織化學染色、HE染色、特殊染色等實驗。
生物信息學分析：文本挖掘，芯片表達譜分析，序列分析，轉(zhuǎn)錄因子靶點預(yù)測，高通量測序數(shù)據(jù)分析等項目
臨床前CRO服務(wù)：主要提供呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)性疾病的藥效學評價服務(wù)，包括靶點驗證、體內(nèi)外模型的構(gòu)建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評價、藥代動力學和藥理學研究以及院內(nèi)制劑研發(fā)等。
項目轉(zhuǎn)化服務(wù)：助力客戶進行方案設(shè)計、聯(lián)合課題申報、藥物項目引進和孵化，解決客戶對實驗技術(shù)平臺、專業(yè)人才、zhuanli申請和融資的需求；
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