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一、實(shí)驗(yàn)材料
1. 組織切片:待染色的組織切片。
2. 染液:包括苯胺藍(lán)、橘黃 G、酸性復(fù)紅等染料。
3. 其他:蒸餾水、酒精、二甲苯、顯微鏡等。
二、實(shí)驗(yàn)原理
Mallory 三色染色法將結(jié)締組織中的三種主要成分(膠原纖維、網(wǎng)狀纖維和彈力纖維)區(qū)別染色,使得不同的組織成分呈現(xiàn)出不同的顏色,便于觀察和分析組織的結(jié)構(gòu)。其中,膠原纖維和網(wǎng)狀纖維被苯胺藍(lán)染成藍(lán)色,軟骨、黏液等被淡藍(lán)色,神經(jīng)膠質(zhì)纖維、肌纖維等被酸性復(fù)紅染成紅色,橘黃 G 用于使細(xì)胞質(zhì)等呈黃色。
三、實(shí)驗(yàn)步驟
1. 脫蠟至水
- 將組織切片放入二甲苯中脫蠟,依次經(jīng)過(guò)兩次二甲苯,每次 5-10 分鐘。
- 然后依次放入梯度酒精(100%、95%、80%、70%等)中進(jìn)行水化,每級(jí)酒精中浸泡 2-3 分鐘,*后用蒸餾水沖洗。
2. 染色
- 將切片放入 Mallory 染液(由苯胺藍(lán)、橘黃 G、酸性復(fù)紅等組成)中染色 5-10 分鐘。
3. 分化與水洗
- 用 0.5%醋酸溶液分化,去掉多余的染色,鏡下控制分化程度,直到組織結(jié)構(gòu)清晰。
- 用蒸餾水沖洗。
4. 脫水透明
- 依次放入梯度酒精脫水,再放入二甲苯中透明。
5. 封片
- 用中性樹(shù)膠封片。
6. 觀察
- 在顯微鏡下觀察染色結(jié)果,分析組織的結(jié)構(gòu)和成分。
達(dá)為科實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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