智啟醫(yī)學(xué)新維度
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一、實驗材料
1. 組織切片或細(xì)胞涂片。
2. 姬姆薩染液。
3. 磷酸鹽緩沖液。
4. 顯微鏡等。
二、實驗原理
姬姆薩染色液由天青,伊紅組成。染色原理和結(jié)果與瑞特染色法基本相同。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)合,染粉紅色,稱為嗜酸性物質(zhì),細(xì)胞核蛋白和淋ba細(xì)胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合,染紫藍(lán)色,稱為嗜堿性物質(zhì),中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合,染淡紫色,稱為中性物質(zhì)。
PH對細(xì)胞染色有一些影響。細(xì)胞里各種成分均不蛋白質(zhì),因為蛋白質(zhì)系兩性電解質(zhì),帶電荷隨溶液PH而定,在偏酸性環(huán)境里下在電荷增多,易和伊紅結(jié)合,染色為偏紅,在偏三性環(huán)境里負(fù)電荷增多,易和美藍(lán)或天青結(jié)合,染色偏藍(lán)。所以細(xì)胞染色對氫離子濃度十分敏感,染色用正經(jīng)片一定清潔,要無酸堿污染。配制頊特液一定用you質(zhì)甲醇,稀釋染色一定用緩沖液,沖洗一定用水應(yīng)近中性,不然可導(dǎo)致各種細(xì)胞染色反應(yīng)異常,以致于識別困難,甚至造成錯誤的。
一般性操作技術(shù)血涂片制備、細(xì)胞染色、顯微檢查、血液病診斷、染色不liang。
三、實驗步驟
1. 制備樣本
- 制作組織切片或細(xì)胞涂片,確保樣本均勻、薄且固定良好。
- 將樣本放入甲醇等固定液中固定一段時間,以保持細(xì)胞形態(tài)。
- 將固定后的樣本放入姬姆薩染液中染色一定時間,通常為幾十分鐘。
- 染色過程中要注意控制染液的濃度和溫度。
- 用磷酸鹽緩沖液輕輕沖洗樣本,去除多余的染液。
- 自然干燥或用濾紙吸干樣本表面的水分。
- 在顯微鏡下觀察染色后的樣本,分析細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和染色特點。
達(dá)為科實驗服務(wù)
分子實驗平臺:高效運作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構(gòu)建、流式細(xì)胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實驗、酶聯(lián)免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實驗。
動物實驗平臺:擁有清潔級、SPF 級動物實驗室,面積約1800平米。具有多種動物模型構(gòu)建經(jīng)驗。
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