Masson 染色是結(jié)締組織染色中*經(jīng)典的一種方法,又稱馬松染色，是顯示組織中纖維的主要方法之一，是膠原纖維染色權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)，分子的大小由分子量來(lái)體現(xiàn)，小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。

然而，淡綠或苯胺藍(lán)的分子量都很大，因此 Masson 染色后肌纖維呈紅色，膠原纖維呈綠色或藍(lán)色，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

一、染色原理

Masson 三色染色方法，是膠原纖維和肌纖維的染色方法，能夠?qū)M織和病理組織進(jìn)行膠原結(jié)構(gòu)的觀察。

而 Van Gieson 染色是利用兩種陰離子染料混合或先或后作用而完成鑒別染色，使膠原纖維呈紅色（被麗春紅所染）肌纖維呈黃色（被苦味酸所染）。

彈力纖維與膠原纖維染色選用維多利亞藍(lán)、麗春紅和苦味酸組合雙重染色方法使彈力纖維呈藍(lán)綠色，膠原纖維呈紅色，背景呈黃色。

2、染色流程

1脫蠟：65度30分鐘，二甲苯脫蠟 5min×2次
2水化：將脫蠟后的切片經(jīng)100%酒精，95%酒精，85%酒精，75%酒精，雙蒸水各3min

3溫?zé)崴矗?/span>30-40℃溫?zé)崴矗看?/span>30-60秒，共兩次。（可以分兩缸溫?zé)崴M(jìn)行漂洗，直至玻片上除樣本以外，其余部分均沒(méi)有顆粒狀水珠為止。）

4 染色前先用蒸餾水潤(rùn)濕玻片30~60秒。

5 R1核染液（試劑盒提供）染色60s左右，倒丟，沖洗液沖洗30s左右。

6 R2漿染液（試劑盒提供）染色30-60s，倒丟，沖洗液沖洗30s左右。

7 R3黃色分色液（試劑盒提供）分色6-8min左右（鏡下觀察樣本中膠原纖維部分褪成淡粉紅色為宜。如果褪色效果不佳，可適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間，使得膠原纖維更易著色）。棄去分色液，（注意不需沖洗）。

8 直接用R4藍(lán)色復(fù)染液（試劑盒提供）染色5min左右，倒丟，用無(wú)水乙醇沖洗干凈。

9 放入烘箱（50-60攝氏度）烘干，中性樹(shù)膠封片。

三、應(yīng)用領(lǐng)域

1. 病理學(xué)研究：幫助病理學(xué)家準(zhǔn)確判斷疾病的類型和嚴(yán)重程度，尤其是在涉及到組織纖維化、腫瘤等疾病的診斷中具有重要價(jià)值。

2. 醫(yī)學(xué)科研：用于研究各種疾病狀態(tài)下組織的結(jié)構(gòu)和功能變化，為疾病的發(fā)病機(jī)制研究提供重要線索。

總之，馬松染色在組織學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中發(fā)揮著重要作用。

達(dá)為科實(shí)驗(yàn)服務(wù)

分子實(shí)驗(yàn)平臺(tái)：高效運(yùn)作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構(gòu)建、流式細(xì)胞儀檢測(cè)、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定、外泌體抽提及鑒定等實(shí)驗(yàn)。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)：擁有清潔級(jí)、SPF 級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，面積約1800平米。具有多種動(dòng)物模型構(gòu)建經(jīng)驗(yàn)。

基因組學(xué)平臺(tái)：可以完成甲基化檢測(cè)、基因芯片分析、高通量測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。

蛋白組學(xué)平臺(tái)：能實(shí)現(xiàn)LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。

病理學(xué)平臺(tái)：涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實(shí)驗(yàn)。

生物信息學(xué)分析：文本挖掘，芯片表達(dá)譜分析，序列分析，轉(zhuǎn)錄因子靶點(diǎn)預(yù)測(cè)，高通量測(cè)序數(shù)據(jù)分析等項(xiàng)目

臨床前CRO服務(wù)：主要提供呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)性疾病的藥效學(xué)評(píng)價(jià)服務(wù)，包括靶點(diǎn)驗(yàn)證、體內(nèi)外模型的構(gòu)建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評(píng)價(jià)、藥代動(dòng)力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內(nèi)制劑研發(fā)等。

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