油紅 O 染色是一種用于組織學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的染色方法。

一、原理

油紅 O 是一種脂溶性染料，可與細(xì)胞內(nèi)的中性脂肪、膽固醇及膽固醇酯等脂質(zhì)成分結(jié)合，使其呈現(xiàn)紅色或橙紅色。

二、應(yīng)用領(lǐng)域

1. 組織學(xué)研究：

- 用于觀察脂肪組織的分布和形態(tài)。

- 檢測(cè)病理狀態(tài)下組織中脂質(zhì)的積累情況，如脂肪肝、動(dòng)脈粥樣硬化等病變組織。

2. 細(xì)胞生物學(xué)：

- 分析細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)代謝情況，如脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中脂質(zhì)的積累變化。

- 研究藥物或其他因素對(duì)細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響。

三、操作步驟

（1）冰凍切片厚度 6～10μm，不固定或 10%福爾馬林固定 10min后水洗

（2）切片加入60%的異丙醇內(nèi)浸洗 2min

（3）用冰蒸餾水稍微清洗一遍（說(shuō)明書(shū)沒(méi)說(shuō)明要洗）

（4）切片加入改良油紅 O 染色液中，密閉染色 10～15min，該過(guò)程注意避光

（5）用冰蒸餾水清洗一遍（說(shuō)明書(shū)沒(méi)說(shuō)明要洗）

（6）加入 60%的異丙醇內(nèi)稍洗以去除染液（大約幾秒）

（7）加入冰蒸餾水中稍微清洗一遍

（8）Mayer 蘇mu素染色液復(fù)染核 5min

（9）用冰蒸餾水清洗一遍

（10）片子用濾紙吸干水分

（11）用甘油明膠或阿拉伯糖膠封片。

四、注意事項(xiàng)

1. 石蠟切片不能用于油紅O染色，原因在于石蠟包埋過(guò)程中需要脫水，脫水過(guò)程中需要乙醇-二甲苯和石蠟，二甲苯是有機(jī)溶劑，會(huì)把中性脂肪溶解；

2. 冰凍切片準(zhǔn)備時(shí)，包埋的降溫過(guò)程建議選擇干冰，原因在于若選擇液氮降溫過(guò)程較強(qiáng)烈，可能導(dǎo)致組織內(nèi)部炸裂，而干冰降溫的過(guò)程比較緩和，染出來(lái)的片子比較好看；

3. 切片的厚度要稍微厚一些，建議選擇8-10μm；

4. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)建議設(shè)計(jì)陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照，如陽(yáng)性對(duì)照可以用脂質(zhì)豐富的肝臟組織等，陰性對(duì)照可以根據(jù)文獻(xiàn)來(lái)選擇無(wú)脂肪沉積的組織。

達(dá)為科實(shí)驗(yàn)服務(wù)

分子實(shí)驗(yàn)平臺(tái)：高效運(yùn)作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構(gòu)建、流式細(xì)胞儀檢測(cè)、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定、外泌體抽提及鑒定等實(shí)驗(yàn)。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)：擁有清潔級(jí)、SPF 級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，面積約1800平米。具有多種動(dòng)物模型構(gòu)建經(jīng)驗(yàn)。

基因組學(xué)平臺(tái)：可以完成甲基化檢測(cè)、基因芯片分析、高通量測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。

蛋白組學(xué)平臺(tái)：能實(shí)現(xiàn)LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。

病理學(xué)平臺(tái)：涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實(shí)驗(yàn)。

生物信息學(xué)分析：文本挖掘，芯片表達(dá)譜分析，序列分析，轉(zhuǎn)錄因子靶點(diǎn)預(yù)測(cè)，高通量測(cè)序數(shù)據(jù)分析等項(xiàng)目

臨床前CRO服務(wù)：主要提供呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)性疾病的藥效學(xué)評(píng)價(jià)服務(wù)，包括靶點(diǎn)驗(yàn)證、體內(nèi)外模型的構(gòu)建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評(píng)價(jià)、藥代動(dòng)力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內(nèi)制劑研發(fā)等。

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