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PI 染色即碘化丙啶染色,是一種常用的細胞生物學染色方法。
一、原理
碘化丙啶(PI)是一種核酸染料,不能透過完整的細胞膜,但在細胞凋亡晚期和壞死細胞中,細胞膜的完整性被破壞,PI 能夠透過細胞膜與細胞內(nèi)的核酸(DNA)結(jié)合,在488 nm的激發(fā)光下發(fā)出紅色熒光。可用于流式細胞儀染色凋亡細胞和細胞核。因為它只染色壞死細胞,所以也可用于區(qū)分凋亡和壞死細胞死亡??膳c標記有異硫氰酸熒光素的常見綠色熒光探針一起使用。
二、應用領(lǐng)域
1. 細胞凋亡檢測:通過檢測 PI 陽性細胞的比例來判斷細胞凋亡的程度。
2. 細胞周期分析:與其他熒光染料結(jié)合使用,可區(qū)分處于不同細胞周期階段的細胞。
三、操作步驟
1. 樣本處理:收集細胞,進行固定等處理。
2. 染色:加入 PI 染液,在特定條件下孵育。
3. 檢測:使用流式細胞儀等設備檢測熒光信號。
四、注意事項
1. 染色過程中要注意避光操作,以防止熒光淬滅。
2. 染液的濃度和染色時間需根據(jù)具體實驗進行優(yōu)化。
3. 操作過程中要避免染液接觸皮膚和黏膜,以免引起傷害。
碘化丙啶(PI染色)的應用:
碘化丙啶是一種不可滲透膜的DNA嵌入劑。在488 nm處有紅色熒光。可用于流式細胞儀染色凋亡細胞和細胞核。因為它只染色壞死細胞,所以也可用于區(qū)分凋亡和壞死細胞死亡??膳c標記有異硫氰酸熒光素的常見綠色熒光探針一起使用。
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