油紅 O 染色是一種用于組織學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的染色方法。

一、原理

油紅 O 是一種脂溶性染料，可與細(xì)胞內(nèi)的中性脂肪、膽固醇及膽固醇酯等脂質(zhì)成分結(jié)合，使其呈現(xiàn)紅色或橙紅色。

二、應(yīng)用領(lǐng)域

1. 組織學(xué)研究：

- 用于觀察脂肪組織的分布和形態(tài)。

- 檢測病理狀態(tài)下組織中脂質(zhì)的積累情況，如脂肪肝、動脈粥樣硬化等病變組織。

2. 細(xì)胞生物學(xué)：

- 分析細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)代謝情況，如脂肪細(xì)胞分化過程中脂質(zhì)的積累變化。

- 研究藥物或其他因素對細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響。

三、操作步驟

（1）冰凍切片厚度 6～10μm，不固定或 10%福爾馬林固定 10min后水洗

（2）切片加入60%的異丙醇內(nèi)浸洗 2min

（3）用冰蒸餾水稍微清洗一遍（說明書沒說明要洗）

（4）切片加入改良油紅 O 染色液中，密閉染色 10～15min，該過程注意避光

（5）用冰蒸餾水清洗一遍（說明書沒說明要洗）

（6）加入 60%的異丙醇內(nèi)稍洗以去除染液（大約幾秒）

（7）加入冰蒸餾水中稍微清洗一遍

（8）Mayer 蘇mu素染色液復(fù)染核 5min

（9）用冰蒸餾水清洗一遍

（10）片子用濾紙吸干水分

（11）用甘油明膠或阿拉伯糖膠封片。

四、注意事項

1. 石蠟切片不能用于油紅O染色，原因在于石蠟包埋過程中需要脫水，脫水過程中需要乙醇-二甲苯和石蠟，二甲苯是有機溶劑，會把中性脂肪溶解；

2. 冰凍切片準(zhǔn)備時，包埋的降溫過程建議選擇干冰，原因在于若選擇液氮降溫過程較強烈，可能導(dǎo)致組織內(nèi)部炸裂，而干冰降溫的過程比較緩和，染出來的片子比較好看；

3. 切片的厚度要稍微厚一些，建議選擇8-10μm；

4. 實驗設(shè)計建議設(shè)計陰性對照和陽性對照，如陽性對照可以用脂質(zhì)豐富的肝臟組織等，陰性對照可以根據(jù)文獻(xiàn)來選擇無脂肪沉積的組織。

達(dá)為科實驗服務(wù)

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