ONC 小鼠模型的構(gòu)建

1、實(shí)驗(yàn)材料

小鼠視神經(jīng)夾傷模型,實(shí)驗(yàn)對(duì)象為8周-12周的野生型C57BL/6J小鼠，體重大約25g左右，雌性及雄性小鼠各半。所有小鼠均以右眼為實(shí)驗(yàn)眼。

視神經(jīng)夾傷手術(shù)具體步驟如下，術(shù)中注意觀察小鼠呼吸及麻醉情況：

（2）確認(rèn)小鼠處于深度麻醉狀態(tài)后，給予小鼠右眼1%普魯卡因滴眼液以降低眼表敏感度，持續(xù)時(shí)間為2分鐘，吸水海綿輕輕移除滴眼液后給予三聯(lián)kang生素眼膏以保護(hù)角膜。對(duì)側(cè)眼即左眼給予Genteal眼凝膠以保護(hù)角膜；

（3）將小鼠置于顯微鏡下的加熱墊(37℃)上以維持小鼠體溫，調(diào)整小鼠位置使其鼻側(cè)向右,修剪小鼠右側(cè)瞼睫毛,在外眼角處做一水平切口,剪開(kāi)外眥；

（4）重新調(diào)整小鼠位置使其鼻側(cè)向左，沿角膜緣在顳側(cè)結(jié)膜上做一個(gè)垂直切口，剪開(kāi)顳側(cè)球結(jié)膜，移除結(jié)膜切口下多余組織，鈍性分離筋膜及肌肉，暴露視神經(jīng)；

（5）暴露視神經(jīng)后，用反向鑷在球后(略超過(guò)視神經(jīng)底部的色素環(huán)，注意避開(kāi)視網(wǎng)膜血管)1mm處夾持視神經(jīng)10秒，10秒后移去鑷子并輕輕將眼球推回原位，將小鼠球結(jié)膜及眼瞼復(fù)位；

（6）小鼠右眼眼表滴一滴人工淚液，在顯微鏡下觀察小鼠眼底血管情況排除視網(wǎng)膜中央動(dòng)脈損傷的可能；

（7）在ONC模型構(gòu)建結(jié)束后，立即予小鼠皮下注射ding丙諾啡0.1mg/kg小鼠體重)止痛zhi療。在小鼠右眼眼表滴一滴1%普魯卡因滴眼液，持續(xù)時(shí)間約30秒，移除1%普魯卡因滴眼液后，在小鼠雙眼眼表給予三聯(lián)kang生素眼膏以保持角膜濕潤(rùn)及預(yù)防術(shù)后感染；

（8）將小鼠放置在加熱墊(37℃)上的鼠籠里(鼠籠中墊紙，鼠籠的一半放置于加熱墊上)，每15分鐘查看小鼠情況并記錄直至小鼠完全蘇醒，小鼠蘇醒后及時(shí)在鼠籠中放置水及泡軟的食物；

（9）注意在術(shù)后三天內(nèi)每天觀察及記錄小鼠感染，出血等情況的發(fā)生。

2、應(yīng)用領(lǐng)域

（1）再生醫(yī)學(xué)研究：研究視神經(jīng)損傷后的再生機(jī)制，探索促進(jìn)神經(jīng)再生的方法和藥物。

（2）疾病機(jī)制研究：了解視神經(jīng)損傷相關(guān)疾病的發(fā)生fa展過(guò)程，如青光眼、外傷性視神經(jīng)病變等。

（3） 藥物篩選：評(píng)估潛在zhi療藥物對(duì)視神經(jīng)損傷的zhi療效果。

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