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細胞瞬轉(zhuǎn)，即細胞瞬時轉(zhuǎn)染，是指將外源核酸導入細胞內(nèi)，使其在短時間內(nèi)表達目的蛋白，但不會隨著細胞分裂而遺傳給子代細胞。
一、瞬轉(zhuǎn)的原理
通過化學試劑（如脂質(zhì)體等）或物理方法（如電穿孔等）將含有目的基因的質(zhì)粒等載體導入細胞中。在細胞內(nèi)，載體上的目的基因借助細胞的轉(zhuǎn)錄和翻譯機制，合成相應的蛋白質(zhì)。
二、瞬轉(zhuǎn)的特點
1. 快速：轉(zhuǎn)染后通常在幾小時到幾天內(nèi)就可以檢測到目的蛋白的表達。
2. 簡單：操作相對簡便，不需要復雜的篩選和穩(wěn)定細胞系構(gòu)建過程。
3. 靈活性高：可以快速測試不同的質(zhì)粒構(gòu)建體、啟動子和調(diào)控元件的效果。
三、瞬轉(zhuǎn)的步驟
1. 細胞準備：選擇合適的細胞系，在適宜的培養(yǎng)條件下進行細胞培養(yǎng)，使其處于良好的生長狀態(tài)。
2. 轉(zhuǎn)染試劑準備：根據(jù)實驗需求選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑，并按照說明書進行準備。
3. 質(zhì)粒準備：提取含有目的基因的質(zhì)粒，確保其質(zhì)量和濃度符合轉(zhuǎn)染要求。
4. 轉(zhuǎn)染操作：將質(zhì)粒與轉(zhuǎn)染試劑混合，加入到細胞培養(yǎng)體系中，按照特定的條件進行轉(zhuǎn)染。
5. 檢測表達：在轉(zhuǎn)染后的適當時間點，通過各種方法檢測目的蛋白的表達情況，如 Western blot、免疫熒光等。
四、瞬轉(zhuǎn)的應用
1. 基因功能研究：用于快速驗證特定基因的功能，觀察其對細胞行為和表型的影響。
2. 蛋白質(zhì)生產(chǎn)：在短時間內(nèi)獲得大量目的蛋白，用于結(jié)構(gòu)分析、功能研究或藥物篩選等。
3. 細胞信號通路研究：通過瞬轉(zhuǎn)特定的基因或突變體，研究細胞信號轉(zhuǎn)導途徑。
