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MTT 實(shí)驗(yàn)全稱為噻唑藍(lán)（3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide，MTT）比色法實(shí)驗(yàn)。
一、實(shí)驗(yàn)原理
活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性 MTT 還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲臜，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在特定波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1. 細(xì)胞培養(yǎng)：將細(xì)胞接種于 96 孔板中，在適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，使其貼壁生長(zhǎng)。
2. 加 MTT 溶液：向每孔加入適量的 MTT 溶液，繼續(xù)培養(yǎng)一定時(shí)間。
3. 終止培養(yǎng)：小心吸去孔內(nèi)培養(yǎng)液，加入 DMSO 溶解甲臜。
4. 測(cè)定吸光度：使用酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的吸光度值。
三、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
1. 細(xì)胞接種密度要適宜，避免過(guò)密或過(guò)疏影響結(jié)果。
2. MTT 溶液的加入量要準(zhǔn)確，且要避免產(chǎn)生氣泡。
3. 溶解甲臜時(shí)要充分振蕩，確保甲臜完全溶解。
4. 測(cè)定吸光度時(shí)要選擇合適的波長(zhǎng)，并確保儀器的準(zhǔn)確性。
四、應(yīng)用領(lǐng)域
1. 細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性研究：通過(guò)比較不同處理?xiàng)l件下細(xì)胞的吸光度值，判斷細(xì)胞的增殖情況或藥物等對(duì)細(xì)胞的毒性作用。
2. 抗腫瘤藥物篩選：評(píng)估抗腫瘤藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制效果。
3. 細(xì)胞生物學(xué)和藥理學(xué)研究：為研究細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、死亡等過(guò)程提供重要的定量數(shù)據(jù)。
