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產(chǎn)品詳情
簡單介紹：
FISH實(shí)驗(yàn)即熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)，是一種重要的分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)，在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛
詳情介紹：
FISH實(shí)驗(yàn)即熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)，是一種重要的分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)，在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，以下是具體介紹：
基本原理
- 堿基互補(bǔ)配對：利用熒光標(biāo)記的核酸探針，依據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則，與待檢測樣本中的核酸序列進(jìn)行特異性結(jié)合，形成雜交體，隨后通過熒光顯微鏡觀察熒光信號，以確定特定核酸序列在細(xì)胞中的位置與數(shù)量。
實(shí)驗(yàn)流程
1. 樣本制備：對待檢測細(xì)胞進(jìn)行處理，使其染色體或DNA處于適合雜交的狀態(tài)，如對細(xì)胞進(jìn)行固定、通透等操作。
2. 探針設(shè)計(jì)與標(biāo)記：依據(jù)檢測目標(biāo)設(shè)計(jì)特異性核酸探針，并采用熒光素等物質(zhì)對探針進(jìn)行標(biāo)記。
3. 雜交反應(yīng)：將標(biāo)記好的探針與樣本在適宜條件下進(jìn)行雜交，使探針與樣本中的核酸序列特異性結(jié)合。
4. 洗滌與檢測：雜交完成后，洗去未結(jié)合的探針，然后利用熒光顯微鏡對樣本進(jìn)行觀察和分析，根據(jù)熒光信號的位置和強(qiáng)度獲取相關(guān)信息。
應(yīng)用領(lǐng)域
- 基因定位：能夠明確特定基因在染色體上的具體位置，助力繪制基因圖譜等研究。
- 疾病診斷：可檢測染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常，如診斷腫瘤細(xì)胞中的染色體畸變，輔助癌癥診斷與分型等。
- 產(chǎn)前診斷：通過檢測羊水細(xì)胞等樣本中的染色體異常，為產(chǎn)前診斷胎兒是否患有染色體疾病提供依據(jù)。
優(yōu)勢與局限性
- 優(yōu)勢：具有高靈敏度和特異性，能夠在細(xì)胞水平實(shí)現(xiàn)對核酸序列的直觀檢測，定位準(zhǔn)確，可同時(shí)檢測多種基因或序列。
- 局限性：對樣本的質(zhì)量和預(yù)處理要求高，探針設(shè)計(jì)需高度特異性，否則易出現(xiàn)假陽性或假陰性結(jié)果，且儀器設(shè)備成本高，技術(shù)難度大。
基本原理
- 堿基互補(bǔ)配對：利用熒光標(biāo)記的核酸探針，依據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則，與待檢測樣本中的核酸序列進(jìn)行特異性結(jié)合，形成雜交體，隨后通過熒光顯微鏡觀察熒光信號，以確定特定核酸序列在細(xì)胞中的位置與數(shù)量。
實(shí)驗(yàn)流程
1. 樣本制備：對待檢測細(xì)胞進(jìn)行處理，使其染色體或DNA處于適合雜交的狀態(tài)，如對細(xì)胞進(jìn)行固定、通透等操作。
2. 探針設(shè)計(jì)與標(biāo)記：依據(jù)檢測目標(biāo)設(shè)計(jì)特異性核酸探針，并采用熒光素等物質(zhì)對探針進(jìn)行標(biāo)記。
3. 雜交反應(yīng)：將標(biāo)記好的探針與樣本在適宜條件下進(jìn)行雜交，使探針與樣本中的核酸序列特異性結(jié)合。
4. 洗滌與檢測：雜交完成后，洗去未結(jié)合的探針，然后利用熒光顯微鏡對樣本進(jìn)行觀察和分析，根據(jù)熒光信號的位置和強(qiáng)度獲取相關(guān)信息。
應(yīng)用領(lǐng)域
- 基因定位：能夠明確特定基因在染色體上的具體位置，助力繪制基因圖譜等研究。
- 疾病診斷：可檢測染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常，如診斷腫瘤細(xì)胞中的染色體畸變，輔助癌癥診斷與分型等。
- 產(chǎn)前診斷：通過檢測羊水細(xì)胞等樣本中的染色體異常，為產(chǎn)前診斷胎兒是否患有染色體疾病提供依據(jù)。
優(yōu)勢與局限性
- 優(yōu)勢：具有高靈敏度和特異性，能夠在細(xì)胞水平實(shí)現(xiàn)對核酸序列的直觀檢測，定位準(zhǔn)確，可同時(shí)檢測多種基因或序列。
- 局限性：對樣本的質(zhì)量和預(yù)處理要求高，探針設(shè)計(jì)需高度特異性，否則易出現(xiàn)假陽性或假陰性結(jié)果，且儀器設(shè)備成本高，技術(shù)難度大。
