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動物實驗動物組織樣本該怎么處理？
動物實驗動物組織樣本該怎么處理？
隨著氣溫的降低，多地迎來了降雪，那么近總是陰雨綿綿的上海會是怎么樣的呢？就在這個時候，上海達為科生物科技有限公司的實驗動物房就要竣工啦！
一、勻漿介質(zhì)的制備:
一般采用pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HCl, 1mmol/L EDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化鈉溶液或直接用0.86%的生理鹽水作為勻漿介質(zhì)。
二、組織勻漿的制備
1、取組織塊（0.1g～0.2g）少可到2～5mg在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，準確稱重，放入5ml的勻漿管中。
2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)（pH7.4， 0.01mol/L Tris-HCl，1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的氯化鈉溶液）或者0.86%的生理鹽水于勻漿管中，冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。
3、勻漿的方式有多種：手工勻漿，機器勻漿，超聲粉碎。
① 手工勻漿：左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手將搗桿垂直插入套管中，上下轉(zhuǎn)動研磨數(shù)十次（6～8分鐘），充分研碎，制成10%的勻漿液。
② 機器勻漿：用組織搗碎機10000～15000 轉(zhuǎn)/分 上下研磨制成10%組織勻漿，也可用內(nèi)切式組織勻漿機制備（勻漿時間10秒/次，間隙30秒，連續(xù)3～5次，在冰水中進行），皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時間。
③ 超聲粉碎：用超聲粉碎機進行粉碎，可用Soniprep150型超聲波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒使細胞破碎，也可用國產(chǎn)超聲波發(fā)生儀，用400安培，5秒/次，間隙10秒反復(fù)3～5次。
鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片（直接涂片、染色均可以），顯微鏡下觀察細胞是否破碎，若沒有則可延長勻漿時間。
4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機2500轉(zhuǎn)/分左右,離心10～15分鐘，取上清液進行測定.
三、樣本保存:
動物組織樣本暫時不測定，可立即低溫凍存，溫度越低越好，中間如不反復(fù)凍融，-20℃以下可保存三個月,-70℃以下可保存六個月。
制備好的勻漿液建議不要凍存,好當(dāng)天進行測定,如放置時間過長相關(guān)酶活會有所下降,部分指標4℃可存放3～5天(如SOD要存放2～3天,MDA可存放3～5,總蛋白測定可存5～7天等。
上海達為科生物科技有限公司，主要致力于基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、生物化學(xué)、病理檢測、基因檢測等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣。通過高度細分、較好的的服務(wù)平臺，為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。
