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為何實(shí)際蛋白條帶與預(yù)測(cè)的不相同？
日期：2025-05-03 17:05
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摘要：
為何實(shí)際蛋白條帶與預(yù)測(cè)的不相同？
蛋白免疫印跡（Westernblotting）是一種根據(jù)尺寸大小來(lái)分離蛋白質(zhì)的技術(shù)。一般來(lái)說(shuō)，蛋白質(zhì)越小，其在凝膠中移動(dòng)的速度越快。然而，移動(dòng)速率也會(huì)受到其他因素的影響，因此實(shí)際跑出的蛋白條帶可能會(huì)與預(yù)測(cè)的不一致。有下面這些可能的因素：
1. 后翻譯修飾——如發(fā)生了磷酸化修飾、糖基化修飾等，會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)變大；
2. 后翻譯剪切位點(diǎn)——許多蛋白先合成蛋白前體，然后再通過(guò)切割一部分來(lái)形成活性蛋白，例如半胱天冬蛋白酶前體；
3. 剪接變異體...
為何實(shí)際蛋白條帶與預(yù)測(cè)的不相同？
蛋白免疫印跡（Westernblotting）是一種根據(jù)尺寸大小來(lái)分離蛋白質(zhì)的技術(shù)。一般來(lái)說(shuō)，蛋白質(zhì)越小，其在凝膠中移動(dòng)的速度越快。然而，移動(dòng)速率也會(huì)受到其他因素的影響，因此實(shí)際跑出的蛋白條帶可能會(huì)與預(yù)測(cè)的不一致。有下面這些可能的因素：
1. 后翻譯修飾——如發(fā)生了磷酸化修飾、糖基化修飾等，會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)變大；
2. 后翻譯剪切位點(diǎn)——許多蛋白先合成蛋白前體，然后再通過(guò)切割一部分來(lái)形成活性蛋白，例如半胱天冬蛋白酶前體；
3. 剪接變異體——同一基因的選擇性剪接會(huì)產(chǎn)生不同大小的蛋白質(zhì)；
4. 相關(guān)的電荷性質(zhì)——氨基酸組成（帶電荷與不帶電荷的）；
5. 多聚體——如蛋白質(zhì)的二聚作用。這通常是防止在還原狀態(tài)下，蛋白質(zhì)發(fā)生強(qiáng)烈的反應(yīng)而導(dǎo)致蛋白質(zhì)變大。
