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小鼠脾臟單細(xì)胞懸液的制備方法
日期:2025-05-01 21:24
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摘要:上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺,能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。?我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,致力于動物模型、動物實(shí)驗(yàn)、動物實(shí)驗(yàn)外包、整體實(shí)驗(yàn)外包,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包、整體畢業(yè)課題等等。
1. 8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血。
2. 在75%的酒精中,浸泡5min。
3. 無菌狀態(tài)下取脾臟。
4. 取一干凈10cm大皿,放入無菌的70um濾網(wǎng),將脾臟置于濾網(wǎng)上,加入2ml培養(yǎng)基。
5. 用研磨棒輕輕研磨臟器,將脾臟組織研磨成單細(xì)胞狀態(tài),直到只剩下臟器的結(jié)締組織為止。
6. 研磨時動作應(yīng)輕柔,用力過大可導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
7. 棄去濾網(wǎng)和濾網(wǎng)上的結(jié)締組織,收集平皿內(nèi)的細(xì)胞懸液,400g4min離心沉淀。
8. 用PBS重懸沉淀,就可以進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。