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10-12周齡雌性大鼠卵巢顆粒細(xì)胞的原代培養(yǎng)
日期：2025-05-01 21:14
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摘要：上海達(dá)為科生物科技有限公司，位于上海長江軟件園，公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺，能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。?我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員（博士后）2人，助理研究員（博士）4人，核心研究員（碩士）15人，致力于動物模型、動物實(shí)驗(yàn)、動物實(shí)驗(yàn)外包、整體實(shí)驗(yàn)外包，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包、整體畢業(yè)課題等等。
1. 10-12周齡雌性SD大鼠，皮下注射孕馬血清促性腺**（Pregnant Mare Serum Gonadotropin，PMSG） 60IU，48h后頸椎脫臼處死。
2. 大鼠浸入75%乙醇浸泡5-10分鐘，轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。
3. 在距離大鼠脊柱1cm、肋下1cm的交叉位置剪開皮膚、肌肉，可見白色的脂肪組織，拉出脂肪組織，可見到粉紅色的卵巢，摘除卵巢。
4. 取卵巢放入預(yù)冷的含雙抗的緩沖液中，用緩沖液清洗卵巢三次,去除周圍組織及表面包膜。
5. 在解剖顯微鏡下用1mL的注射器刺破卵泡，釋放顆粒細(xì)胞。
6. 將懸液通過70μm篩網(wǎng)過濾至50ml離心管中，之后200g，離心7min。
7. 計(jì)數(shù)，種植到24孔板和大皿中。
8. FSHR表達(dá)鑒定顆粒細(xì)胞。
