凍存、復(fù)蘇細(xì)胞的辦法和注意事項

上海達(dá)為科生物主營實驗技術(shù)服務(wù)，以下分享的是凍存、復(fù)蘇細(xì)胞的辦法和注意事項 ，同時我們還提供各種細(xì)胞實驗（復(fù)蘇，技術(shù)支持等）。

凍存、復(fù)蘇細(xì)胞的辦法和注意事項之細(xì)胞凍存：

1. 時機(jī)不會：

細(xì)胞狀況不好（長的太過了，培養(yǎng)液現(xiàn)已很黃；細(xì)胞可疑污染；細(xì)胞已經(jīng)開始凋亡或崩解；連續(xù)培養(yǎng)超越二個月，細(xì)胞性狀已有改動改動）

佳機(jī)遇：細(xì)胞增殖旺盛，狀況安穩(wěn)，實驗作用杰出，復(fù)蘇后兩周內(nèi)

2. 細(xì)胞太少：

凍存時細(xì)胞濃度低于1-5×1000,000/ml。（復(fù)蘇很難成功）

離心后調(diào)整細(xì)胞濃度。（不要從頭洗細(xì)胞）

3. 蓋子不緊：

凍存管的蓋子要擰緊，不然復(fù)蘇水浴時會滲水，構(gòu)成污染。

挑選原配的管子和蓋子

4. 單薄的凍存盒：

放在－80度的凍存盒，壁太薄，細(xì)胞在被迅速降溫。

挑選厚壁泡沫塑料盒，或塞入很多干棉花。（凍存的原則：緩降?。?/span>

5. -80度太久：

放在－80度冰箱的時刻超越半年。（冰箱的溫度難以恒定:開門/關(guān)門，電壓不穩(wěn)等）

趕快轉(zhuǎn)入液氮。

6. 液氮缺乏：

液面不能漫過一切細(xì)胞。

定期丈量液氮儲藏，細(xì)胞悉數(shù)浸在液面下。

7. 取錯細(xì)胞：

找不到/拿錯凍存管。

每支凍存管都標(biāo)上細(xì)胞的稱號，凍存時刻，并記載在冊本來，只需凍存作業(yè)完成的好，復(fù)蘇大多沒有艱難，可是要有耐性。

凍存、復(fù)蘇細(xì)胞的辦法和注意事項之復(fù)蘇細(xì)胞：

1. 取錯細(xì)胞：

拿錯凍存管。（快快快，匆忙當(dāng)中，難免犯錯，何況－170多度，凍手?。?/span>

核對記載冊及凍存管上細(xì)胞的稱號、時刻是不是共同。

拿細(xì)胞時戴手套！

2. 水浴時刻太長：

2min還沒消融。（凍存管的壁較厚，隔熱）

恰當(dāng)進(jìn)步水浴溫度（37度－40度）

要是冬季，就選用保溫盒。

3. 冰盒內(nèi)時刻太長：

復(fù)蘇1h后，還沒有加入新的培養(yǎng)液。（高濃度DMSO避免胞內(nèi)構(gòu)成冰晶，凍存時維護(hù)細(xì)胞，但復(fù)蘇融解后，浸泡時刻太久會，對細(xì)胞有毒性）

提早預(yù)定超凈臺，削減復(fù)蘇后插在冰盒里等候的時刻。

4. 失掉耐性：

復(fù)蘇三四天后，細(xì)胞沒有動靜，以為失敗，倒掉一切細(xì)胞。（有些細(xì)胞復(fù)蘇后一星期，才有起色）

不要換液，耐性等候，兩周后再做決議。

溫馨提示：如您還想了解本公司凍存、復(fù)蘇細(xì)胞的辦法和注意事項 的更多詳情，你可以登錄我們的網(wǎng)頁或者撥打我們的電話電話，我們將熱情為您服務(wù)！