高脂血癥又稱為血脂異?；蛑x紊亂，是指血清中膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）過高和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）過低，它是引起心腦血管發(fā)病的重要危險因素之一。國內(nèi)外**高脂血癥的化學藥種類較多，以他汀類、貝特類及煙酸類為主，其中他汀類藥物為選，其降血脂作用強，作用機制明確，但會產(chǎn)生肝損傷、肌肉病變、皮膚過敏、消化系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)疾病等**反應(yīng)。研制**高脂血癥中藥具有很好的前景?，F(xiàn)代中醫(yī)學認為，高脂血癥的病因由素體脾虛痰盛；或飲食不節(jié)，恣食肥甘，痰濁淤阻；或肝氣郁滯，痰瘀互結(jié)，化為脂濁，滯留體內(nèi)而為病。各種原因?qū)е缕⒏文I功能失調(diào)，脾失健運，肝失疏泄，腎失氣化，痰、濕、瘀、氣滯等病理產(chǎn)物交阻，清濁不分是本病的基本病機。臨床上多采用升清降濁、**健脾、疏肝**、**化瘀等氣血雙調(diào)中藥防治高脂血癥。

為了有效尋找高脂血癥的發(fā)病機制和防治措施及中藥**藥物，選擇理想的高脂血癥動物模型復制方法、制備適合能展示中藥特色優(yōu)勢的動物模型尤為重要。國內(nèi)外常用的高脂血癥動物模型復制方法是高脂飼料喂養(yǎng)法，由于此法存在造模周期長，高脂飼料易發(fā)生變質(zhì)等弊端，越來越多的新型復制方法被采用。現(xiàn)將實驗性高脂血癥動物模型復制方法比較分析如下。

1 慢性高脂血癥動物模型復制方法

1.1 高脂飼料喂養(yǎng)法 高脂飼料喂養(yǎng)法是通過在普通飼料中添加不同比例的膽固醇（0.5%～20%）、豬油或脂肪（2%～60%）、蛋黃粉（2%～15%）、膽鹽（0.1%～2%）、甲（丙）基硫氧嘧啶（0.1%～1%）等高膽固醇、高甘油三酯成分來引起動物脂質(zhì)代謝異常，大鼠是國內(nèi)外研究脂質(zhì)代謝多的實驗動物，由于大鼠無膽囊，在配方中加入膽鹽，其目的主要是促進大鼠有效吸收膽固醇與脂肪，動物迅速形成高脂血癥模型，使血清膽固醇值升高穩(wěn)定，造成脂代謝紊亂，同時引起血液黏度升高。此法操作方便，與人類“飲食不節(jié)，恣食肥甘”等高脂高蛋白飲食形成高血脂的過程相似，并能展示中藥防治高脂血癥特色優(yōu)勢，是國內(nèi)外比較常用的一類造模方法，其缺點在于飼料用量不易掌握，造模周期過長，動物易出現(xiàn)厭食現(xiàn)象，高脂飼料不易長期保存。在高脂飼料配方中，動物血清TC的水平主要受膽固醇比例的影響，而TG水平則主要受豬油比例的影響。隨著膽固醇比例的下降，TC也呈現(xiàn)下降趨勢；隨著豬油比例的降低，TG呈現(xiàn)下降趨勢。并且同樣的高脂飼料配方，由于各成分比例或動物品種差異，模型復制結(jié)果尤其是對HDL-C的影響也不同。

Lee等采用高脂飼料（主要含豬油31.6%）連續(xù)喂養(yǎng)小鼠12周，結(jié)果模型組小鼠血脂水平TC，TG，LDL-C和HDL-C都明顯升高，可能是由于長期喂養(yǎng)高脂飼料導致模型動物形成非酒精性脂肪肝或肝臟受損，HDL-C才出現(xiàn)異常升高。也有學者采用高脂飼料喂養(yǎng)法[主要含豬油（7%～60%）、膽固醇（0.15%～2%）]復制高脂血癥動物模型，結(jié)果模型組動物血脂4項指標也都明顯升高。

Saravanan等采用高脂飼料（主要含脂肪35.8%）連續(xù)喂養(yǎng)小鼠10周，結(jié)果模型組小鼠血清TC，TG，LDL-C明顯升高，HDL-C明顯降低，與人類高脂血癥的血脂指標變化一致。也有學者采用高脂飼料喂養(yǎng)法[主要含豬油（10%～23%）、膽固醇（1%～2%）]得到了相似的結(jié)果。

1.2 脂肪乳劑灌胃法 脂肪乳劑灌胃法是在豬油、膽固醇、膽鹽、甲（丙）基硫氧嘧啶等原料，加入量的乳化劑[如聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯（吐溫-80）]攪拌混勻配制而成的高脂乳劑，通過灌胃的方式每日定量給予動物來復制高脂血癥動物模型。在其原料中大多加用抗甲狀腺素分泌類藥物，以降低膽固醇向膽汁酸轉(zhuǎn)化。模型復制過程中，脂肪乳劑的配制是一個非常關(guān)鍵的步驟，要乳劑的充分研勻、乳化。該法能動物服用足量的高脂飲食，造模周期相對較短，且避免了動物的“厭食”現(xiàn)象，模型建立穩(wěn)定。其缺點是脂肪乳劑黏稠度高，灌胃操作困難，動物易出現(xiàn)腹瀉癥狀，精神狀態(tài)差，易影響實驗結(jié)果的穩(wěn)定性和性。

學者采用脂肪乳劑（豬油20%～25%、膽固醇10%、膽鹽2%、丙硫氧嘧啶片1%、吐溫-80 10%～25%和丙二醇10%～20%）每日定量連續(xù)灌胃給予動物若干天復制高脂血癥動物模型，結(jié)果模型組動物血清TC，TG，LDL-C明顯升高，HDL-C明顯降低，與人類高脂血癥的血脂指標變化一致。Akbari等以0.025 mL?kg^-1?min^-1的速度靜脈注射脂肪乳（10%甘油三酯）給予綿羊連續(xù)6 h，結(jié)果脂肪乳組從開始注射后的2～6 h綿羊血清游離脂肪酸（FFA）、TG明顯升高，但血清TC無顯著性差異，說明這種特殊的靜脈性脂肪乳適合于復制高甘油三酯動物模型的研究。

1.3 復合因素造模法 復合因素造模法是通過喂養(yǎng)高脂飼料的同時給予其他干預(yù)手段（如脂肪乳劑灌胃或添加高糖、飲酒等）復制高脂血癥動物模型。由于單純給予高脂飼料造模周期較長，且含有豬油可能容易使高脂飼料變質(zhì)，從而影響造模結(jié)果；而脂肪乳劑灌胃過程中又易對動物的消化道造成損傷，甚至會導致動物死亡。故將兩者聯(lián)合運用，造模效果可能會更理想。

林昶等用高脂飼料喂養(yǎng)加灌服脂肪乳14 d成功復制高脂血癥大鼠模型。唐琪晶等采用高糖高脂飼料（含蔗糖10%、豬油10%）喂養(yǎng)加梯度酒飲2周，成功建立了大鼠代謝性高脂血癥模型；該模型不僅能升高TC，TG，LDL-C，還能降低HDL-C，同時造模時間短，與人類高脂血癥形成過程相符。

1.4 **注射法 **注射法是通過給實驗動物皮下或肌肉注射氫化可的松或地塞米松復制腎虛型高脂血癥動物模型。**注射法可能是阻斷了下丘腦-垂體-腎上腺軸的功能導致脂代謝紊亂。此法可用于腎虛型高脂血癥相關(guān)代謝疾病的研究。

趙敏等給大鼠肌肉注射氫化可的松5 mL?kg^-1，連續(xù)15 d。結(jié)果發(fā)現(xiàn)模型組大鼠血清TC，TG，LDL-C，肝組織膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白（CETP）和脂肪酸合成酶（FAS）均明顯升高，血清HDL-C明顯降低。徐安莉等利用大劑量肌注（0.005 mL?g^-1）氫化可的松與高脂乳劑（20%熟豬油、10%雞蛋黃、10%膽固醇、2%去氧膽酸鈉、1%丙硫氧嘧啶、5%吐溫-80）灌胃模型連續(xù)15 d造成大鼠血脂紊亂。結(jié)果氫可模型組和高脂乳劑模型組血清TG，TC，LDL-C含量顯著升高，HDL-C含量顯著降低，并且氫化可的松模型組TC及LDL-C的增高程度明顯高于高脂乳劑模型組。Santhosh Kumar V R等給大鼠皮下注射地塞米松10 mg?kg^-1，連續(xù)8 d，結(jié)果發(fā)現(xiàn)模型組大鼠血清TC，TG明顯升高。

1.5 鉛灌胃法 鉛灌胃法是通過把含有量鉛的水溶液灌胃給實驗對象復制高脂血癥動物模型。鉛能誘導高脂血癥是由于鉛能抑制細胞色素P450活性，從而影響甾醇獨立基因調(diào)控肝酶對膽固醇的體內(nèi)代謝。

Liu等通過給大鼠灌胃醋酸鉛水溶液（Pb質(zhì)量濃度為500 mg?L^-1），連續(xù)75 d，結(jié)果鉛灌胃組大鼠血清TC，TG，LDL-C均明顯升高，HDL-C明顯降低，肝組織羥甲戊二酰輔酶A還原酶（HMGR）也明顯增加。

1.6 DCP（1，3-二氯丙醇）灌胃法 DCP灌胃法是連續(xù)灌胃給予實驗對象小于1 mg?kg^-1?d^-1劑量的1，3-二氯丙醇若干周復制高脂血癥動物模型。DCP誘導高脂血癥是通過調(diào)節(jié)腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信號通路，該通路在脂質(zhì)代謝過程中發(fā)揮著重要的作用；該研究也是次發(fā)現(xiàn)灌胃給予小鼠3種不同劑量（0.1，0.5，1 mg?kg^-1）的1，3-二氯丙醇連續(xù)4周能成功復制高脂血癥動物模型，并且該法在升高小鼠血清TC，TG，LDL-C，增加肝重、肝TC，TG，降低血清HDL-C呈現(xiàn)的劑量依賴性。該法是一種新型的高脂血癥動物模型復制方法，相對于傳統(tǒng)復制方法而言，此法操作簡便，經(jīng)濟實惠，可用于調(diào)脂藥物的作用機制研究。

1.7 牛奶喂養(yǎng)法 牛奶本身就是高脂肪、高蛋白食品，容易造成動物營養(yǎng)過剩，引起肥胖癥狀，導致高脂血癥。此法簡單、經(jīng)濟，是一種新型的高脂血癥復制方法。

吳爭榮等每天在飲水瓶中加入新鮮牛奶喂養(yǎng)小鼠，連續(xù)30 d，結(jié)果小鼠體重、肝指數(shù)均明顯升高，小鼠血清及肝TC，TG，LDL-C升高，HDL-C降低，小鼠的腹腔內(nèi)壁及臟器上都附有大量黃色脂肪油，具有明顯高脂血癥癥狀。岳翠麗等^[35]采用60%，70%，80%，90%，的全脂牛奶乳濁液，代替飲用水連續(xù)喂飼小鼠28 d，結(jié)果小鼠血清TC，LDL-C顯著升高，但HDL-C并未出現(xiàn)明顯下降。

2 急性高脂血癥動物模型復制方法

2.1 Triton WR1339注射法 Triton WR1339注射法是通過給實驗對象一次性尾靜脈或腹腔注射Triton WR1339建立急性高脂血癥動物模型。Triton WR1339是一種表面活性劑，能抑制脂蛋白酯酶的活性來增加血漿TG和極低密度脂蛋白膽固醇（VLDL-C）的含量。此法操作簡便，藥效評價快速，常用于調(diào)脂藥物的篩選。此法造模劑量與血脂水平呈現(xiàn)的依賴性，造模后時間的延長也會影響血脂水平的變化。

Harnafi等給大鼠腹腔注射200 mg?kg^-1的Triton WR1339，7 h后，結(jié)果與正常對照組相比，模型對照組大鼠血清TG升高了約22倍，TC升高了約2倍；而給小鼠腹腔注射200 mg?kg^-1的Triton WR1339，7 h后，結(jié)果與正常對照組相比，模型對照組小鼠血漿TG升高了約4倍，TC升高了約2倍，說明在同等造模劑量下，實驗對象采用大鼠比小鼠建立的急性高脂血癥模型效果更好。Gawlik等給大鼠腹腔注射300 mg?kg^-1的Triton WR1339，2 h后，結(jié)果與正常對照組相比，模型對照組大鼠血清TG升高了約25倍，TC升高了約7倍，說明造模劑量越大，高脂模型組動物血脂水平升高更快。

Rony等給大鼠腹腔注射300 mg?kg^-1的Triton WR1339，24 h后，結(jié)果與正常對照組相比，模型對照組大鼠血清TG升高了約10倍，TC升高了約4倍，LDL-C升高了約6倍，HDL-C降低約1倍。Vijayaraj等給大鼠尾靜脈注射300 mg?kg^-1的Triton WR1339，48 h后，結(jié)果與正常對照組相比，模型對照組大鼠血清TC，TG，LDL-C，VLDL-C，AI顯著升高，HDL-C顯著降低，說明隨著造模后時間的延長，高脂模型組動物血脂水平升高緩慢即可能達到峰值。

2.2 蛋黃乳劑注射法 蛋黃乳劑注射法是采用新鮮雞蛋黃加生理鹽水混勻配制成75%蛋黃乳劑腹腔注射到小鼠體內(nèi)建立急性高脂血癥動物模型。蛋黃乳劑注射法是由于動物攝入過多外源性膽固醇而形成的血脂升高。此法操作簡便、經(jīng)濟、模型建立迅速，也常用于調(diào)脂藥物的篩選。與正常對照組相比，模型對照組通過給小鼠腹腔注射75%蛋黃乳劑可以使小鼠血清TC升高約1～3倍，TG升高約1～10倍。

2.3 poloxamer-407注射法 poloxamer-407（P-407，泊洛沙姆407）注射法是用蒸餾水配制成P-407溶液腹腔注射到小鼠或大鼠體內(nèi)建立高脂血癥動物模型。P-407升高血脂是通過改變體內(nèi)脂質(zhì)代謝通路上的相關(guān)酶實現(xiàn)的，并沒有外源脂質(zhì)的介入。Zanwar等給大鼠腹腔注射30%的P-407溶液1 mL，0，15，24 h后取血測指標，結(jié)果與正常對照組比較，在15，24 h后模型組大鼠血清TC，TG，VLDL-C均明顯升高，HDL-C明顯降低。當分別給大鼠腹腔注射0.13 g?mL^-1的P-407溶液1 g?kg-1、小鼠腹腔注射P-407溶液0.5 mL，24 h后取血測指標， 結(jié)果與正常對照組比較，模型組大鼠血清TC，TG均明顯升高。

2.4 CPF（毒死蜱）注射法 CPF（chlorpyrifos）注射法是通過一次性給實驗對象皮下注射50 mg?kg^-1的毒死蜱復制高脂血癥動物模型。于給藥2，4，8，12，24 h后取血測指標，結(jié)果發(fā)現(xiàn)24 h后，大鼠血清TC無明顯變化，TG，LDL-C均明顯升高，HDL-C明顯降低50]。

2.5 四氧嘧啶注射法 四氧嘧啶是一種結(jié)構(gòu)類似葡萄糖的特異性細胞毒劑，能選擇性破壞產(chǎn)生胰島素的細胞，引起細胞死亡，導致血中胰島素濃度下降及高血糖產(chǎn)生，形成胰島素依賴性糖尿病，糖尿病患者普遍存在脂代謝異常，糖尿病脂代謝紊亂是引發(fā)動脈粥樣硬化的主要因素之一，因此以四氧嘧啶復制高脂血癥模型更適合于研究糖尿病高脂血癥。

王大為等給大鼠尾靜脈注射四氧嘧啶56 mg?kg^-1，大鼠血清TC，TG明顯升高。國外學者^[54-56]通過給實驗動物一次性腹腔或皮下注射劑量的四氧嘧啶，動物血清TC，TG明顯升高。

3 先天性高脂動物模型

Watanabe研究發(fā)現(xiàn)了具有遺傳性高血脂癥的家兔即為WHHL（watamabe heritable hyperlipidemic），WHHL攜帶有一個可遺傳的變異基因，導致缺少低密度脂蛋白受體而出現(xiàn)高脂血癥，與人類家族型高膽固醇血癥相似。該模型更適合于高膽固醇血癥的研究。Kune等^[58]利用先天性高甘油三酯血癥模型大鼠探討了脂質(zhì)代謝紊亂與血小板聚集之間的關(guān)系。結(jié)果表明先天性高甘油三酯血癥模型大鼠能明顯抑制由凝血酶和ADP誘導的血小板聚集活性，一方面是由于抑制血栓素A2合成酶，另一方面也與脂代謝紊亂有的關(guān)系，且遺傳性高脂血癥的患者罕見。

4 轉(zhuǎn)基因高脂動物模型復制方法

轉(zhuǎn)基因法是通過基因敲除或調(diào)控載脂蛋白（Apo）基因的表達來復制高脂血癥動物模型。

4.1 脂蛋白酯酶（LPL）基因敲除 脂蛋白酯酶是**血漿脂蛋白中所含甘油三酯的限速酶，屬于絲氨酸活性酶類。LPL是由肝外細胞合成的甘油三酯水解酶。TG在LPL的作用下裂解為FFA和甘油。脂蛋白酯酶基因敲除小鼠體內(nèi)FFA水平升高，可以用來建立高甘油三酯血癥。李慧等采用LPL基因敲除建立小鼠高脂血癥模型，結(jié)果小鼠血漿TC，TG升高，出現(xiàn)極度高甘油三酯血癥表型。

4.2 載脂蛋白轉(zhuǎn)基因模型 ApoE基因缺陷動物模型是常用的轉(zhuǎn)基因法之一。ApoE參與轉(zhuǎn)運膽固醇和調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，是調(diào)節(jié)脂蛋白代謝的關(guān)鍵性載脂蛋白，同時還具有的神經(jīng)生物學作用。Patterson等采用ApoE基因缺陷小鼠復制實驗性高脂血癥動物模型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)模型小鼠的TC水平比正常小鼠高出4倍，TG水平高出2倍。王亞楠等建立了脂蛋白脂肪酶和載脂蛋白E雙基因缺陷的混合型高甘油三酯和高膽固醇血癥動物模型，比較了雙基因以及載脂蛋白E基因缺陷小鼠的血漿甘油三酯，總膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇的水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)雙基因缺陷小鼠血漿TG是載脂蛋白E基因缺陷小鼠的3.8倍，血漿總TC也略有增加。

5 結(jié)語

根據(jù)中醫(yī)病因病機分析，人類飲食不節(jié)、恣食肥甘、飲酒無度、情志失調(diào)可導致脾肝腎臟腑功能失調(diào)，從而導致氣血津液代謝障礙，釀生病理性痰濁血瘀，進而加重病情的發(fā)生和發(fā)展。因此，高脂血癥又可歸于“肥胖”、“痰濕”、“血瘀”、“濁阻”等范疇，痰瘀內(nèi)阻證是高脂血癥的主要證型。

綜上所述，實驗性高脂血癥動物模型復制方法種類繁多。先天性和轉(zhuǎn)基因高脂動物模型由于其來源困難，成本高，代價昂貴，且與大多數(shù)高脂血癥的患者的病因也不一致，影響了其應(yīng)用。理想的動物模型應(yīng)該是與人類疾病接近，可重復，且試驗操作簡單、實驗成本相對較低、易于推廣；模型復制成功與否直接影響整個實驗過程的準確性和結(jié)果的可靠性。

國內(nèi)外為常用的慢性高脂血癥動物模型復制方法是高脂飼料喂養(yǎng)法，其次是脂肪乳劑灌胃法，這2種方法都是經(jīng)過消化道給予的，形成時間也相對較長，與人類“飲食不節(jié)，恣食肥甘”等高脂高蛋白飲食形成高血脂的病因病機相似，對降血脂藥物的研究開發(fā)具有很高的應(yīng)用價值，可用于降血脂藥物一般藥效學的實驗研究。由于體內(nèi)**水平不同，一般而言，雄性動物較雌性動物容易形成高脂血癥，所以復制高脂血癥動物模型大多選用雄性動物。**注射法操作簡便，經(jīng)濟實惠，但有的局限性，一般只用于腎虛型高脂血癥相關(guān)代謝疾病的研究。鉛灌胃法和DCP灌胃法都能影響脂質(zhì)代謝過程中相關(guān)酶的活性，可用于降血脂藥物作用機制的實驗研究。單純牛奶喂養(yǎng)法經(jīng)濟便捷，可考慮用于一般藥效學研究。

對于幾種急性高脂血癥動物模型復制方法來說，操作簡便，藥效評價快速，一般是作為降血脂藥物的初步篩選和單純的高脂血癥研究，而對于機制性研究方面有局限。并且由于其在實驗動物體內(nèi)影響途徑各不相同，其應(yīng)用也不同。Triton WR1339注射法和CPF注射法可用于高甘油三酯血癥調(diào)脂藥物的篩選，蛋黃乳劑注射法可用于高膽固醇血癥調(diào)脂藥物的篩選，P-407注射法可用于混合型高脂血癥調(diào)脂藥物的篩選或其作用機制的初步研究，四氧嘧啶注射法則更適合于糖尿病高脂血癥的研究。另外由于造模動物的生理功能反映與人類不盡相同，并不能較的反映人類高脂血癥的各種變化。故在模型動物的選擇上，要考慮造模動物的脂質(zhì)代謝、生理功能反映等應(yīng)盡可能與人類相似，從而為人類高脂血癥的預(yù)防和**提供思路。