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結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng)總結(jié)會(huì)
2024年5月8日，周三，公司組織，由實(shí)驗(yàn)室主管劉博主導(dǎo)，實(shí)驗(yàn)室全體成員參與，對(duì)結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，進(jìn)行了培訓(xùn)與交流。本次會(huì)議，主要針對(duì)結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng)，就以下內(nèi)容展開(kāi)了交流：
1.組織4℃條件下從醫(yī)院取回。
2.消毒取樣的15ml管，取出組織，放到10ml大皿中。
3.用含4抗的PBS溶液浸泡，清洗組織。
4.再用組織緩沖液浸泡、清洗三遍。
5.將組織剪成1mm3大小的組織塊，轉(zhuǎn)移到15ml管中消化。
6.在37℃水浴鍋中，消化15min。
7.取少量液體在顯微鏡下觀察，看到較多的單細(xì)胞和較少的細(xì)胞簇后，終止消化。
8.用100μm篩過(guò)濾，然后300g4℃離心5min，移去上清。
9.重懸沉淀，轉(zhuǎn)移到2ml離心管中，300g4℃離心5min，移去上清。
10.估算沉淀的細(xì)胞量，以1:25的比例添加基質(zhì)膠，重懸。
11.24孔板鋪板，冰上操作，每孔點(diǎn)膠25ul。
12.鋪板后，放到37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中15min成膠。
13.然后每孔添加600ul 結(jié)直腸癌類器官培養(yǎng)基，放到37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中。
本次會(huì)議，提升公司對(duì)結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng)的重要知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)知
