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新生小鼠原代心肌成纖維細胞的分離與培養(yǎng)分享
日期：2025-04-26 02:14
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摘要：上海達為科生物科技有限公司，位于上海長江軟件園，公司目前具備較好的生物學、醫(yī)學技術(shù)服務(wù)平臺，能夠為廣大客戶提供醫(yī)學科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。?我們擁有專業(yè)的實驗室、先進的實驗設(shè)備和經(jīng)驗豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團隊包括研究員（博士后）2人，助理研究員（博士）4人，核心研究員（碩士）15人，致力于動物模型、動物實驗、動物實驗外包、整體實驗外包，細胞實驗、細胞實驗外包、整體畢業(yè)課題等等。
2024年5月9日，周四，公司組織，由實驗室主管劉博主導(dǎo)，實驗室全體成員參與，對新生小鼠原代心肌成纖維細胞的分離與培養(yǎng)的相關(guān)知識點，進行了培訓(xùn)與交流。本次會議，主要針對新生小鼠原代心肌成纖維細胞的分離與培養(yǎng)，就以下內(nèi)容展開了交流：
1. 準備0-1天內(nèi)的C57BL/6J小鼠新生鼠。
2. 用溫的無菌去離子水，輕輕擦拭每只新生鼠。
3. 用70%的乙醇徹底去除新生鼠身體上的污染物。
4. 斷頭，取心臟，心臟置于冰的PBSG溶液中。
5. 除去血液和非心臟組織。
6. 剪碎心臟組織。
7. 加入胰酶-膠原酶消化液，每只新生鼠75ul。
8. 在37°C的搖床培養(yǎng)箱中，以250 rpm/ 5 min，消化心肌組織。
9. 輕輕渦旋，然后離心10秒，丟棄**次消化的上清液。
10. 開始**次消化，250 rpm/ 5 min后，輕輕渦旋，然后離心10秒，收集上清液到2倍體積的胎牛血清中。
11. 重復(fù)上述消化過程，共進行8次消化，收集細胞懸液。
12. 使用沒有包被的10cm大皿，預(yù)種植細胞1h。
13. 1小時后，將培養(yǎng)皿從培養(yǎng)箱中取出，移除沒貼壁的細胞及上清液，加入完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
本次會議，提升公司對新生小鼠原代心肌成纖維細胞的分離與培養(yǎng)的重要知識點的認知
