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Western Blot注意事項(xiàng) ?
日期：2025-05-03 17:06
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摘要：
Western Blot注意事項(xiàng)
1.濾紙、膠、膜之間的大小，一般是濾紙>=膜>=膠。
2.濾紙、膠、膜之間千萬(wàn)不能有氣泡，氣泡會(huì)造成短路。
3.因?yàn)镈EPF膜的疏水性，膜在甲醇中浸濕。而且在以后的操作中，膜也隨時(shí)保持濕潤(rùn)（干膜法除外）。
4.濾紙可以重復(fù)利用，上層濾紙（靠膜）內(nèi)吸附有很多轉(zhuǎn)移透過(guò)的蛋白質(zhì)，所以上下濾紙不能弄混，在不能分辨的情況下，可以將靠膠濾紙換新的。
5.轉(zhuǎn)移時(shí)間一般為1.5 小時(shí)，( 1mA-2mA/cm2，10% gel)，可根據(jù)分子量大小調(diào)整轉(zhuǎn)移時(shí)間和電流大小。
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Western Blot注意事項(xiàng)
1.濾紙、膠、膜之間的大小，一般是濾紙>=膜>=膠。
2.濾紙、膠、膜之間千萬(wàn)不能有氣泡，氣泡會(huì)造成短路。
3.因?yàn)镈EPF膜的疏水性，膜在甲醇中浸濕。而且在以后的操作中，膜也隨時(shí)保持濕潤(rùn)（干膜法除外）。
4.濾紙可以重復(fù)利用，上層濾紙（靠膜）內(nèi)吸附有很多轉(zhuǎn)移透過(guò)的蛋白質(zhì)，所以上下濾紙不能弄混，在不能分辨的情況下，可以將靠膠濾紙換新的。
5.轉(zhuǎn)移時(shí)間一般為1.5 小時(shí)，( 1mA-2mA/cm2，10% gel)，可根據(jù)分子量大小調(diào)整轉(zhuǎn)移時(shí)間和電流大小。
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