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裸鼠腫瘤模型建立
1.提供如下多種方法建立腫瘤模型:
(1)裸鼠皮下腫瘤模型
(2)誘發(fā)性腫瘤模型
(3)移植性腫瘤模型
(4)肺部高轉(zhuǎn)移腫瘤模型
(5)膠質(zhì)瘤模型
2.成瘤實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)由于其更能模擬人類的生理和病理?xiàng)l件,在科研上,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)獲得的結(jié)果,將更具有說(shuō)服力。腫瘤研究中,常規(guī)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)就是裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)。由于大部分腫瘤研究使用的是人類細(xì)胞,所以存在異種排除的存在,需要使用免疫缺陷型小鼠作為移植模型的載體,通過(guò)對(duì)該小鼠原位或皮下移植腫瘤細(xì)胞或組織,使其成瘤,觀察瘤體的生長(zhǎng)來(lái)判斷其生物學(xué)變化。
3.肺原位成瘤方法介紹
實(shí)驗(yàn)步驟
1、準(zhǔn)備足量細(xì)胞,將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的各實(shí)驗(yàn)組成瘤細(xì)胞胰酶消化后,培養(yǎng)基重懸成細(xì)胞懸液;
2、用血球計(jì)數(shù)板對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),并終用體積基質(zhì)膠重懸,使細(xì)胞懸液的濃度為 2E+7個(gè)細(xì)胞/ml(以2E+6/只接種量);
3、準(zhǔn)備好腫瘤細(xì)胞后(2E+7/mL),使用一次性胰島注射器,吸取細(xì)胞懸液,肺原位注射。每只100ul;
4、每周一次在活體成像儀下觀察成瘤情況:按 10μl/g 的量腹腔注射D-Luciferin(15mg/mL),過(guò) 15分鐘以后,使用活體成像儀器自帶氣體麻醉系統(tǒng)進(jìn)行異氟烷氣體麻醉,然后將 其放置于活體成像儀下進(jìn)行成像,觀察熒光,保存數(shù)據(jù);
5、根據(jù)不同腫瘤細(xì)胞原位成瘤能力強(qiáng)弱不同適時(shí)結(jié)束實(shí)驗(yàn),結(jié)束前對(duì)小鼠進(jìn)行活體成像,方法同上。成像結(jié)束后,對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行注射過(guò)量2%液體麻醉劑(0.5mL)安樂(lè)致死,待其昏迷再進(jìn)行頸椎脫臵確認(rèn)死亡;
6、用醫(yī)用剪刀和醫(yī)用鑷子解剖動(dòng)物,觀察其肺部及瘤體組織;使用游標(biāo)卡尺測(cè)量瘤體長(zhǎng)寬,計(jì)算腫瘤體積;使用精密天平稱取瘤體及肺重量;
7、根據(jù)活體成像結(jié)果觀察肝臟、**、脾臟等其他器官組織,看是否有出現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶; 并取下進(jìn)行觀察;
8、將取出的肺、瘤體等器官組織,按照客戶要求,放于4%多聚甲醛固定常溫保存或液氮冷凍后-80°保存,以備送樣;
9、整理數(shù)據(jù),制作完整報(bào)告。
4.服務(wù)說(shuō)明:
動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)涉及的細(xì)胞可由客戶提供,也可查看公司的產(chǎn)品庫(kù),亦可由本公司代購(gòu);
特殊功能的細(xì)胞可由本公司優(yōu)惠提供或由本公司代購(gòu)。