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透射電鏡制樣及取材方法
透射電鏡制樣流程：
1.取樣
因戊二醛和鋨酸的固定深度有限，樣品越小越好，盡量取1mm*1mm*1mm。
2.先固定戊二醛在3%-6%。
參考：25%戊二醛（買(mǎi)Sigma公司的G5885或者更高濃度的戊二醛）和0.2M PBS
配置為戊二醛5%和0.1M PBS緩沖液的混合工作液；時(shí)間：常溫4小時(shí)后，4度冰箱過(guò)
夜。
3. 清洗
PBS緩沖液沖洗。要洗干凈，否則戊二醛和鋨酸會(huì)產(chǎn)生沉淀。參考：每15-30
分鐘更換一次，共4次。
4.后固定
參考:鋨酸2%，固定4小時(shí)。劇毒，在通風(fēng)櫥操作。
5.清洗
PBS緩沖液沖洗。
6.梯度脫水
參考：乙醇梯度脫水:30-50-70-90-95-100-，每次10-15分鐘，無(wú)水乙醇中加分子篩
或者無(wú)水硫酸銅，提前一周配置好備用。
7.滲透
參考：spurr樹(shù)脂。包埋板即可。
8.包埋聚合
參考：70度，24小時(shí)。
10.超薄切片
11.染色（1）醋酸雙氧鈾封口膜上染色，染色時(shí)間參考：10分鐘（鈾染）;（2）水清洗;
（3）檸檬酸鉛因其極易和空氣產(chǎn)生鉛沉淀，染色時(shí)旁邊放NaOH顆粒，注意避光。
組織和器官取材方法： 事先準(zhǔn)備好所需的器械和固定液，并把它放4℃冰箱內(nèi)預(yù)冷備用。如為穿刺物（腎組織、肝組織、脾組織等）、剪取物（胃鏡剪取物、支氣管鏡剪取物、腸鏡剪取物等）、手術(shù)切除物（腫瘤組織以及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物臟器等），均應(yīng)在離體后迅速用生理鹽水沖洗后或直接投入預(yù)冷的2.5%戊二醛固定液（保質(zhì)期為1個(gè)月）內(nèi)，并把它放4℃冰箱內(nèi)保存，一般要求在兩分鐘內(nèi)完成。
