免疫磁珠免疫磁珠(Immunomagnetic bead, IMB) 簡稱磁珠,免疫磁珠由載體微球和免疫配基結(jié)合而成。免疫磁珠的大小和形狀的均一性,可使靶細胞迅速和有效地結(jié)合到磁珠上;它的球形結(jié)構(gòu)可消除與不規(guī)則形狀粒子有關的非特異性結(jié)合;超順磁性可使磁珠置于磁場時,顯示其磁性,從磁場移出時,磁性消除,磁珠分散;保護性殼可防止金屬顆粒漏出。

將磁珠按磁珠功能基結(jié)合的蛋白質(zhì)不同分為: 包被一抗的磁珠、包被二抗的磁珠、未包被的磁珠和包被抗生物素的磁珠。并針對不同抗原制出包被相應抗體的試劑盒,方便了使用。

免疫磁珠的主要特點有: 分離速度快、效率高、可重復性好; 操作簡單、不需要昂貴的儀器設備;不影響被分離細胞或其它生物材料的生物學性狀和功能

免疫磁珠標記方法 1直接磁珠和直接標記法：通過物理吸附和共價鍵結(jié)合直接將特意性抗體與磁珠耦合，然后再與相應細胞結(jié)合，形成細胞-抗原-抗體-磁珠復合物，在外磁場下直接分離目的細胞?？焖?、簡單、特異性和細胞得率高，靈敏度低，需制備相應的偶聯(lián)抗體磁珠。2間接磁珠和間接標記法：使用anti-lg等與磁珠偶聯(lián)，通過Anti-lg再使磁珠與二抗體偶聯(lián)，分離細胞時，先使細胞與一抗特異性結(jié)合，然后在與一抗標記磁珠結(jié)合，形成細胞-1抗-2抗-anti-lg-磁珠復合體，在外磁場下分離目的細胞的方法。該法增加了細胞的洗滌步驟，特異性也會降低。該法一般用于①沒有直標磁珠抗體②需用幾種抗體去除多種細胞③目的細胞上特異性抗原分子表達水平低。

免疫磁珠分選方法 陽性分選：運用特異性抗體偶聯(lián)磁珠直接從細胞混合物中分離目的細胞的分選方法稱為positive selection.陽性分選中磁珠標記的細胞即為目的細胞。該法簡單、快速、細胞得率和純度較高。如采用anti-CD14磁珠分選CD14+巨噬細胞。陰性分選：用抗體偶聯(lián)磁珠去除無關細胞，使目的細胞得以純化和分離的分選方法稱為negative selection.陰性分選中磁珠標記的細胞為非目的細胞。如分離CD4+T細胞時，由于沒有專用的CD4+T細胞分選磁珠，可通過anti-CD8、anti-B220、anti-CD49b、anti-CD11b、anti-Ter119標記磁珠去除CD8+T細胞、B細胞、NK細胞、DC細胞、巨噬細胞、粒細胞等，終而獲得較純的CD4+T細胞。因此陰性分選法適用于：①從細胞混合物中去除某種類型細胞。

如腫瘤細胞。②缺乏針對目的細胞篩選的特異性抗體磁珠時。③抗體和目的細胞結(jié)合可能誘導細胞活化，影響后續(xù)細胞功能分析時。復合分選：將陰性分選和陽性分選相結(jié)合的分選方法。當目的細胞含量特別低，無法直接進行陽性分選時，可采用陰性分選發(fā)先出去其他雜細胞，當目的細胞富集到程度時在采用陽性分選發(fā)篩選目的細胞。

免疫磁珠分離技術的優(yōu)點是:分離速度快、效率高、可重復性好、操作簡單，不需昂貴儀器設備,不影響被分離細胞或其它生物材料的生物學性狀和功能等,從而在微生物檢測方面具有很大的優(yōu)勢。缺點：免疫磁珠敏感性不高，易于其他雜菌交叉反應，價格昂貴，應用受到限制。

免疫磁珠分離技術的發(fā)展方向：高敏感性磁珠的制造技術，降低磁珠生產(chǎn)成本，免疫磁珠與其它檢測手段聯(lián)用技術，免疫磁珠技術應用技術，總的來說，免疫磁珠分離技術未來將在生物醫(yī)學、食品、農(nóng)業(yè)科研、新藥開發(fā)等領域具有更加廣泛的發(fā)展前景。