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磁珠分選的原理及各類磁珠的優(yōu)缺點(diǎn)

日期:2025-05-04 05:18
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摘要: 免疫磁珠法分離細(xì)胞原理: 免疫磁珠法分離細(xì)胞是基于細(xì)胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結(jié)合,在外加磁場中,通過抗體與磁珠相連的細(xì)胞被吸附而滯留在磁場中,無該種表面抗原的細(xì)胞由于不能與連接著磁珠的特異性單抗結(jié)合而沒有磁性,不在磁場中停留,從而使細(xì)胞得以分離。 免疫磁珠法分為正選法和負(fù)選法: 正選法-磁珠結(jié)合的細(xì)胞就是所要分離獲得的細(xì)胞。 負(fù)選法-磁珠結(jié)合不需要的細(xì)胞,游離于上清液的細(xì)胞為所需細(xì)胞。 一般而言,負(fù)選法比正選法的磁珠用量大。 磁珠...

免疫磁珠法分離細(xì)胞原理:

      免疫磁珠法分離細(xì)胞是基于細(xì)胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結(jié)合,在外加磁場中,通過抗體與磁珠相連的細(xì)胞被吸附而滯留在磁場中,無該種表面抗原的細(xì)胞由于不能與連接著磁珠的特異性單抗結(jié)合而沒有磁性,不在磁場中停留,從而使細(xì)胞得以分離。

免疫磁珠法分為正選法和負(fù)選法:

正選法-磁珠結(jié)合的細(xì)胞就是所要分離獲得的細(xì)胞。

負(fù)選法-磁珠結(jié)合不需要的細(xì)胞,游離于上清液的細(xì)胞為所需細(xì)胞。

一般而言,負(fù)選法比正選法的磁珠用量大。

磁珠: 大小在0.1-0.45mm 包被了生產(chǎn)的高質(zhì)量單抗磁珠已為白細(xì)胞亞群的分選所優(yōu)化 將包被了特異性單抗的BD IMag磁珠加入細(xì)胞懸液,磁珠特異性地與有相應(yīng)抗原的細(xì)胞亞群結(jié)合,通過分離得到的連有磁珠的細(xì)胞可直接用于功能試驗(yàn)和用流式細(xì)胞儀檢測。

磁分離細(xì)胞的重要指標(biāo)是:

      純度和得率,這取決于磁珠所連接單抗的特異性和磁珠大?。ù判裕欢〉拇胖榈寐什桓?,太大的磁珠又會影響細(xì)胞活性,也無法直接上流式。

磁珠 優(yōu)點(diǎn):對細(xì)胞溫和,不影響分離細(xì)胞的后續(xù)培養(yǎng),可直接上流式檢測,不影響散射光。

小磁珠 缺點(diǎn):需要很強(qiáng)的磁場來分離細(xì)胞,分離速度慢,得率不高,需要一次性的分離柱,不能在普通試管進(jìn)行,成本昂貴。

大磁珠 優(yōu)點(diǎn):技術(shù)簡單,分離可在試管中完成,易于增減細(xì)胞用量,速度快,得率高,成本低。

大磁珠 缺點(diǎn):對細(xì)胞造成機(jī)械壓力,影響其生物學(xué)活性,不利于分離后培養(yǎng),純度低,阻塞FCM的噴嘴  。

 

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