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上海達(dá)為科免疫共沉淀CO-IP技術(shù)**可靠
上海達(dá)為科免疫共沉淀CO-IP技術(shù)**可靠-IP（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。
以下是免疫共沉淀co-IP的主要優(yōu)點(diǎn)：
（1）相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的，處于天然狀態(tài)；
（2）蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的，可以避免人為的影響；
（3）可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。
免疫共沉淀co-IP（Co- Immunoprecipitation, Co-IP）是利用抗原和抗體的特異性結(jié)合以及**的Protein A或G特異性地結(jié)合到免 疫球蛋白的Fc片段的現(xiàn)象開發(fā)出來的方法。其基本原理是，在細(xì)胞裂解液中加入抗興趣蛋白的抗體，孵育后再加入與抗體特異結(jié)合的結(jié)合于Agarose珠上的Protein A或G，若細(xì)胞中有與興趣蛋白結(jié)合的目的蛋白，就可以形成這樣一種復(fù)合物：“目的蛋白—興趣蛋白—抗興趣蛋白抗體—Protein A或G”，經(jīng)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，復(fù)合物又被分開。然后經(jīng)免疫印跡或質(zhì)譜檢測目的蛋白。這種方法得到的目的蛋白是在細(xì)胞內(nèi)與興趣蛋白天然結(jié)合的，符合體內(nèi)實(shí)際情況，得到的結(jié)果可信度高。這種方法常用于測定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合；也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。
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