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細(xì)胞實(shí)驗(yàn)活力檢測
日期：2025-05-02 02:43
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摘要：上海達(dá)為科生物科技有限公司，是一家致力于免疫學(xué)、分子生物學(xué)、病理、病理分子生物、代謝組學(xué)、生物化學(xué)技術(shù)在科研中的應(yīng)用和推廣，專業(yè)從事相關(guān)產(chǎn)品的引進(jìn)、服務(wù)和研發(fā)。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中總有一些因各種原因而死亡的細(xì)胞，總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比叫做細(xì)胞活力。細(xì)胞活力檢測在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，是比不可少的一個(gè)過程，由組織中分離細(xì)胞一般要檢查活力，以了解分離的過程對細(xì)胞是否有損傷作用；復(fù)蘇后的細(xì)胞也要檢查活力，了解凍存和復(fù)蘇的效果。細(xì)胞懸液制備后，常用活體染料臺盼藍(lán)對細(xì)胞染色，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)...
上海達(dá)為科生物科技有限公司，是一家致力于免疫學(xué)、分子生物學(xué)、病理、病理分子生物、代謝組學(xué)、生物化學(xué)技術(shù)在科研中的應(yīng)用和推廣，專業(yè)從事相關(guān)產(chǎn)品的引進(jìn)、服務(wù)和研發(fā)。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中總有一些因各種原因而死亡的細(xì)胞，總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比叫做細(xì)胞活力。細(xì)胞活力檢測在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，是比不可少的一個(gè)過程，由組織中分離細(xì)胞一般要檢查活力，以了解分離的過程對細(xì)胞是否有損傷作用；復(fù)蘇后的細(xì)胞也要檢查活力，了解凍存和復(fù)蘇的效果。細(xì)胞懸液制備后，常用活體染料臺盼藍(lán)對細(xì)胞染色，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過程中，正常細(xì)胞胞膜完整，臺盼藍(lán)不能透過活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞胞膜通透性增加，臺盼藍(lán)能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而使細(xì)胞著色（藍(lán)色）。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)過程中，細(xì)胞活力檢測操作步驟：
1. 配制4%臺盼藍(lán)母液：稱取4g臺盼藍(lán)，加少量蒸餾水研磨，加雙蒸水至100mL，用濾紙過濾，4℃保存。使用時(shí)用PBS稀釋至0.4%。
2. 胰酶消化貼壁細(xì)胞，制備單細(xì)胞懸液，并作適當(dāng)稀釋（106 cells/mL）。
3. 取少量細(xì)胞懸液與0.4%臺盼藍(lán)溶液以9:1混合，輕輕吹打混勻，染色2~3min。
4. 顯微鏡下觀察，死細(xì)胞著淺藍(lán)色并膨大，無光澤；活細(xì)胞保持正常形態(tài)，無色透明有光澤。若需計(jì)算活細(xì)胞率則將染色的細(xì)胞懸液滴入細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
活細(xì)胞率（%）= 活細(xì)胞總數(shù)/（活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù)）×
注意事項(xiàng)：臺盼藍(lán)染細(xì)胞時(shí)，時(shí)間不宜過長。否則，部分活細(xì)胞也會著色，會干擾計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。
上海達(dá)為科生物科技有限公司，位于上海長江軟件園，主營實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)，核酸化系列試劑盒，細(xì)胞株等。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中總有一些因各種原因而死亡的細(xì)胞，總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比叫做細(xì)胞活力。細(xì)胞活力檢測在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，是比不可少的一個(gè)過程，由組織中分離細(xì)胞一般要檢查活力，以了解分離的過程對細(xì)胞是否有損傷作用；復(fù)蘇后的細(xì)胞也要檢查活力，了解凍存和復(fù)蘇的效果。細(xì)胞懸液制備后，常用活體染料臺盼藍(lán)對細(xì)胞染色，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過程中，正常細(xì)胞胞膜完整，臺盼藍(lán)不能透過活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞胞膜通透性增加，臺盼藍(lán)能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而使細(xì)胞著色（藍(lán)色）。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)過程中，細(xì)胞活力檢測操作步驟：
1. 配制4%臺盼藍(lán)母液：稱取4g臺盼藍(lán)，加少量蒸餾水研磨，加雙蒸水至100mL，用濾紙過濾，4℃保存。使用時(shí)用PBS稀釋至0.4%。
2. 胰酶消化貼壁細(xì)胞，制備單細(xì)胞懸液，并作適當(dāng)稀釋（106 cells/mL）。
3. 取少量細(xì)胞懸液與0.4%臺盼藍(lán)溶液以9:1混合，輕輕吹打混勻，染色2~3min。
4. 顯微鏡下觀察，死細(xì)胞著淺藍(lán)色并膨大，無光澤；活細(xì)胞保持正常形態(tài)，無色透明有光澤。若需計(jì)算活細(xì)胞率則將染色的細(xì)胞懸液滴入細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
活細(xì)胞率（%）= 活細(xì)胞總數(shù)/（活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù)）×
注意事項(xiàng)：臺盼藍(lán)染細(xì)胞時(shí)，時(shí)間不宜過長。否則，部分活細(xì)胞也會著色，會干擾計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。
上海達(dá)為科生物科技有限公司，位于上海長江軟件園，主營實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)，核酸化系列試劑盒，細(xì)胞株等。
