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細胞培養(yǎng)那些事
日期:2025-05-02 02:21
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摘要:
細胞培養(yǎng)那些事
a.實驗進行前,先擺好操作臺,開啟操作臺及無菌室紫外燈**30-60min;
b.**后關(guān)閉無菌室、操作臺紫外,并開啟日光燈15-20min后打開操作臺和無菌室加裝濾網(wǎng)的通風系統(tǒng)5-10min以降低臭氧濃度(減少對操作人員的傷害),開始實驗。
c. 實驗人員穿好實驗服,戴好口罩及手套后方可進入實驗室。這一方面可以減少無菌室的污染,一方面可以保護實驗員的**。對于來自人類或是病毒感染之細胞株應特別小心操作,并選擇適當?shù)燃壷疅o菌操作臺,并且操作期間切不可弄傷手部及接觸感染源的皮膚。
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細胞培養(yǎng)那些事
a.實驗進行前,先擺好操作臺,開啟操作臺及無菌室紫外燈**30-60min;
b.**后關(guān)閉無菌室、操作臺紫外,并開啟日光燈15-20min后打開操作臺和無菌室加裝濾網(wǎng)的通風系統(tǒng)5-10min以降低臭氧濃度(減少對操作人員的傷害),開始實驗。
c. 實驗人員穿好實驗服,戴好口罩及手套后方可進入實驗室。這一方面可以減少無菌室的污染,一方面可以保護實驗員的**。對于來自人類或是病毒感染之細胞株應特別小心操作,并選擇適當?shù)燃壷疅o菌操作臺,并且操作期間切不可弄傷手部及接觸感染源的皮膚。
d.實驗操作前用75%酒精擦拭工作區(qū)域,并應在抬面之中央無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作,在酒精燈附近操作。
e.實驗時避免經(jīng)過培養(yǎng)皿或試劑瓶上空,小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口。
g.為防止交叉污染,細胞培養(yǎng)液(DMEM、RPMI-1640等)應分裝標記使用。一種細胞使用對應瓶分裝的培養(yǎng)基。
h.培養(yǎng)基使用前調(diào)整溫度至37℃。
i.Trypsin、FBS、NBS應分裝使用,避免反復凍融。
j.經(jīng)常檢查細胞培養(yǎng)箱內(nèi)的CO2的濃度、溫度、濕度等,查看CO2 鋼瓶的內(nèi)外壓力表,定期檢查操作臺及無菌室的通風過濾系統(tǒng)、紫外**燈等,并注意維護,定期更換。