裸鼠腫瘤接種一般有細胞接種和瘤塊接種兩種方式，接種取材有手術(shù)活檢標本、癌性胸腹水標本和體外培養(yǎng)的細胞系三種。

做體外培養(yǎng)的細胞的裸鼠接種，一般用帶6號針頭的注射器取適量細胞懸液注射于裸鼠的皮下，部位看試驗要求而定，一般在腋下或背部皮下，每個接種部位注射0.1-0.2ml。就是將培養(yǎng)的細胞收集起來調(diào)整到適宜濃度重懸于不含血清的培養(yǎng)液或PBS中，放于冰盒中攜至動物房，直接注射即可。

是牽涉到細胞株的成瘤性問題，可以通過增大細胞懸液濃度的辦法來解決。一般細胞濃度可在1*10的6次方到5*10的7次方之間，濃度再大就可能打不進去了。具體濃度需要查相關(guān)文獻。如果成瘤率太低，可以通過把瘤塊在裸鼠身上傳2—3代的方法提高成瘤率，即將已成瘤鼠的瘤塊取出接種于新鼠身上，成瘤后再取出接種新鼠，如此傳幾代，腫瘤性質(zhì)穩(wěn)定后，再將腫瘤取出，剪碎、研磨、勻漿成為細胞懸液后再接種。

一、可移植性腫瘤的建立方法

1．腹水瘤的建立將動物實體瘤細胞注入受體動物腹腔內(nèi)，或?qū)嶓w疤移植于受體動物的腹壁內(nèi)，腫瘤生長后引起腹水，腹水內(nèi)含高大量瘤細胞可移植傳代．即為腹水瘤。

建議腹水瘤初期、腹水往往是血性，多次傳代后逐漸變?yōu)槿榘咨牧鲂愿顾?。腹水如培養(yǎng)基一樣供給瘤細胞生長所需的營養(yǎng)。若將腹水瘤細胞注入皮下，又可形成實體瘤。由于瘤細胞游離在腹水內(nèi)，因此總呈圓形，體積可有大、中、小之分c：r．在一些細胞邊緣偶見大小不等的泡狀突起，稱之為“鼓泡”。一般在接種后第5天時核分裂相達高峰。

偶見三吸或四極分裂。

二。腫癌移植方法

1．常規(guī)保種傳代方法

(1)腹水瘤移植方法：瘤源一般用接種后第5～6天的腹水，抽出的腹水以乳白色為佳。接種應(yīng)從下腹部件入受體動物腹腔，一般接種o．1一o．2m1。可在腹水內(nèi)加適量的抗凝藥物。

(2)實體型腫瘤接種法：

1)小塊接種法：將瘤取出后，切開，選出生長良好而無變性壞死、呈談紅色、魚肉狀的瘤組織，切成小塊(約5*5*5mm)；在受體動物腹部外例剪開—個小口，用無鉤眼科鑷子夾取小塊，送入切口內(nèi)皮下。本法多用于建瘤株的初期及少量的接種。接種部位以腋窩和鼠蹊部為佳，特別是腋窩部皮膚松弛能使瘤結(jié)長得較大，宿主壽命也可延長。

2)懸液接種法：將選取的瘤組織用玻璃勻漿器研磨制成懸液，用注射器吸取瘤懸液．先計算活細胞數(shù)．再將瘤懸液注射到接種部位(多種丁皮下)，細胞數(shù)多在1000000～10000000。注射后用小鑷夾針孔片刻，可避免注入液外溢。本法適用于成活率高的移植瘤的常規(guī)接種或大批接種實驗。

3)瘤組織漿接種法：此法曾被廣泛使用。從實體瘤選出新鮮瘤組織，剪碎成漿后即可做注射用。多適用于大動物(免、狗)的移植瘤。以較高成活率。移植部位以體內(nèi)深部肌肉內(nèi)或器官內(nèi)較佳，家兔的成骨肉瘤移植多用此法。

(4) 培養(yǎng)細胞的移植法：將單層培養(yǎng)的細胞消化脫壁后稀釋為濃度的細胞懸液，移植于動物皮下或其他部位。

活細胞計數(shù)方法如下：用新配制的0.05％伊紅或0.1％臺盼藍生理鹽水溶液．將瘤細胞懸液稀釋、混勻后在血球計數(shù)盤上計數(shù)．染色者為死細胞、不染色為活細胞 .