創(chuàng)傷**，一直是醫(yī)學(xué)研究中重要的課題之一。然而，其相關(guān)的研究進(jìn)展卻長期受限于以下兩方面因素的影響：①缺乏合適的異常瘢痕形成的動物模型；②缺乏敏感的能定量反映創(chuàng)傷和創(chuàng)傷修復(fù)的方法。動物模型對于創(chuàng)傷**研究來說，其重要性不容置疑。就如同發(fā)生在人類的其他各系統(tǒng)疾病一樣，要深刻認(rèn)識它們的本質(zhì)，了解其相應(yīng)病理改變或測試某一種藥物或**方法對其是否有效和**，都應(yīng)該先在相應(yīng)的動物實(shí)驗(yàn)模型上進(jìn)行研究和驗(yàn)證，然后才能在臨床上應(yīng)用和推廣?？梢哉J(rèn)為，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展離不開動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷膹V泛應(yīng)用。近年來，在創(chuàng)傷**領(lǐng)域，關(guān)于動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷难芯坑辛艘恍┬碌倪M(jìn)展和成果報(bào)道，如下。

1、動物模型的選擇原則

一般動物模型的選擇，應(yīng)該注意以下幾點(diǎn)基本原則：①能正確復(fù)制所要研究的損傷或病變；②可以多次或用多種方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；③實(shí)驗(yàn)可被別人重復(fù)；④在實(shí)驗(yàn)中可獲取多個(gè)活檢標(biāo)本；⑤容易操作并與動物實(shí)驗(yàn)設(shè)備相適應(yīng)；⑥有可供實(shí)驗(yàn)觀察的足夠時(shí)間。而在創(chuàng)傷**研究中，動物模型的選擇需要更加精準(zhǔn)和。對于不同的創(chuàng)傷**類型或是同一**類型中不同階段某個(gè)具體問題的研究，應(yīng)該由與之對應(yīng)的或相似度高的不同實(shí)驗(yàn)動物模型來進(jìn)行。例如：在研究**創(chuàng)面**的收縮增強(qiáng)過程時(shí)，選用小鼠**模型較佳。而在研究創(chuàng)傷修復(fù)的再上皮化過程時(shí)，刃厚皮片供區(qū)的創(chuàng)面**模型或點(diǎn)狀植皮動物模型均被認(rèn)為是合適的選擇。

2、急性傷口**模型

急性傷口**模型(models of acute woundhealing)，是指創(chuàng)傷發(fā)病急、致傷因素較為明確、病程相對較短，不伴有其他明顯影響**的有害因素存在，創(chuàng)口以急性炎癥反應(yīng)為特征的一類創(chuàng)傷**模型。

2．1切開性傷口模型：通常是用剪刀或刀片切割動物皮膚，形成線形切口，可深至皮下。常用的動物有鼠、兔或豬等，切口常選在動物的背部或腹部。這一模型可用于觀察傷口**過程以及各種全身或局部使用的藥物、敷料等對傷口**的影響作用。另外，此模型還常被用來研究**創(chuàng)面的抗張力強(qiáng)度(tensile strength)，其傳統(tǒng)方法是在傷口**過程中不同時(shí)間點(diǎn)上分別切取創(chuàng)面標(biāo)本，再用表面張力計(jì)測量其張力強(qiáng)度，后作比較和分析。這種方法作為一種體外性測試，并且測量值是通過與切口垂直方向的單向拉力來獲取，因而與切口實(shí)際的多軸向力學(xué)作用相比還存在著差異。Gingrass等設(shè)計(jì)了一種活體測量傷口張力強(qiáng)度的動物模型，其方法是通過真空負(fù)壓裝置作用于SD大鼠的線形切口區(qū)，依靠吸引作用產(chǎn)生多軸向拉力。其相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，這一模型的測量參數(shù)更接近臨床實(shí)際，結(jié)果也更為確實(shí)可信。

 2．2切除性傷口模型：使用特制的打孔器或剪刀、刀片在動物體表(多在背部)切除面積的皮膚全層或斷層組織而制備。人體開放性創(chuàng)傷**過程的各個(gè)階段，包括肉芽形成、膠原沉積、再上皮化和收縮過程等，都可以在這一模型中進(jìn)行模擬和觀察研究。各種局部用藥或敷料等的療效測試以及一些影響**的外界因素的作用分析，也都可以利用此實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛠磉M(jìn)行。由于不同深度的開放性傷口有著不同類型的**方式，模擬制備的相應(yīng)動物傷口模型，也就大致可分為兩種：即部分厚度的切除傷口模型和全厚切除傷口模型。部分厚度(保留部分真皮層)的切除傷口模型，或稱斷層皮膚切除傷口模型，一般是用標(biāo)準(zhǔn)取皮刀在皮膚相對較厚的動物身上制備而成。與人類皮膚結(jié)構(gòu)近似的小豬或小香豬，使用為廣泛。這一模型特別適用于再上皮化過程的研究，其評價(jià)指標(biāo)主要是創(chuàng)面的再上皮化率與創(chuàng)口的實(shí)際閉合時(shí)間。全層厚度的皮膚切除傷口模型，動物的選擇和制作方法基本同上。它被廣泛地用于衡量影響創(chuàng)傷修復(fù)的各種因素的作用，如不同類型的敷料、皮膚替代品及局部用藥等都可以在此模型上進(jìn)行觀察和研究。另外，因傷口收縮的程度在動物皮膚和人體皮膚之間有較大的差異性，如嚙齒類的小鼠，傷口的**90％依賴其傷口收縮作用，為了增加動物模型與人體創(chuàng)傷**過程的相似度，在制作模型時(shí)，就可以采取各種方法來盡量減低這一因素的差異。Carlson等在制作的小鼠切口模型兩側(cè)，用類似夾板樣固定的處理方式，程度上有效地限制了其傷口收縮作用。而Mustoe等在1991年所報(bào)道的兔耳創(chuàng)傷模型的建立，也是利用兔耳腹側(cè)皮膚下方軟骨所產(chǎn)生的類夾板樣作用對傷口收縮的限制，從而使對肉芽組織形成和再上皮化等**過程的研究更利于開展和深入。近年來，Falanga等在小鼠尾部制作的全層切除傷口模型，Mustoe等。在小鼠頭頂部制作的切口模型，原理和方法大致如此。

2．3**傷口模型：燒(燙)傷動物模型的研究進(jìn)展較快，各種深度**模型的制備，都有不少的方法可供選用。就創(chuàng)傷**研究而言，，動物的選擇應(yīng)該是與人皮膚組織結(jié)構(gòu)相似的豬、狗和大小鼠、豚鼠等較好；其次，建立**模型的方法可選用火焰**(凝固汽油、酒精等)和輻射**(溴鎢燈、閃光粉等)這兩大類，具體可根據(jù)實(shí)際研究需要而定。而**模型還可選用熱金屬燙灼法、點(diǎn)狀溫?zé)?*法和熱水(蒸汽)**法等。相對來說，**的溫度容易控制，作用均勻、面積也易掌握，一般比**模型穩(wěn)定、準(zhǔn)確、重復(fù)性好。在制作模型時(shí)還應(yīng)研究和關(guān)注的是：①動物體表**面積的準(zhǔn)確估計(jì)，往往容易將其數(shù)值估計(jì)過高；②體表面積**的動物，是否能引起與人體相似的全身性系統(tǒng)反應(yīng)。此外，由于人體深度**在臨床上通常采用局部切除加皮瓣(片)移植的**方式，其相關(guān)的動物模型研究也在逐步開展中。

3、損傷傷口**模型

損傷傷口**模型(models of impaired wound healing)，是指在創(chuàng)傷**過程中，由于受到或合并存在影響**的各種體內(nèi)外因素的制約，如營養(yǎng)**、感染、局部缺血、糖尿病、靜脈瘀滯不暢、壓力相關(guān)因素以及輻射損傷等所造成的以慢性難**創(chuàng)面為基本表現(xiàn)的一類動物模型。下面，我們將其中幾種較為常用、研究也相對較多的模型及其進(jìn)展介紹如下：

3．1感染傷口模型：這一模型的制作過程并不復(fù)雜，只需將量已知濃度的某種致病菌加到動物的傷口創(chuàng)面，再定時(shí)檢測傷口組織的病理學(xué)改變并進(jìn)行創(chuàng)面**計(jì)數(shù)。由于傷口**感染對組織修復(fù)的影響，也有其雙重性的作用存在，即大量重度的感染明顯延遲**，少量輕度感染常能加快**，故**的局部作用濃度是一個(gè)關(guān)鍵性要素。付小兵等認(rèn)為，一般**計(jì)數(shù)超過lOs個(gè)／g組織創(chuàng)面**將發(fā)生困難，而在動物**計(jì)數(shù)還需要更高一些。Kendra等在小鼠**感染模型的相關(guān)研究中，將200～300 CFU的綠膿桿菌注射接種于5mm×5mm的**創(chuàng)面皮下，獲得了較理想的模型效果和可重復(fù)性的實(shí)驗(yàn)結(jié)論。

3．2局部缺血傷口模型：局部缺血傷口模型的制作

方法，大致可以分為兩類：一類是通過血管結(jié)扎方式來制備，Mustoe等將兔耳腹側(cè)面的三條供血?jiǎng)用}其中兩條結(jié)扎而制成的兔耳局部缺血模型，對于研究慢性創(chuàng)傷**過程中各種**手段或處理因素的作用和意義可算是一種上佳的動物模型；另一類方法則是運(yùn)用皮瓣形成的原理來制備，即通過增加其長寬比例來使皮瓣遠(yuǎn)端形成缺血性改變。許多研究者設(shè)計(jì)了如雙蒂皮瓣或單蒂肌皮瓣等各式各樣的皮瓣模型，為不同實(shí)驗(yàn)的實(shí)際需要提供了多種選擇和參考。

3．3糖尿病潰瘍模型：欲制備糖尿病潰瘍的動物模型，需要獲得患糖尿病的實(shí)驗(yàn)動物。而這就有兩種方法可供選擇：①用化學(xué)藥物(如四氧嘧啶等)破壞正常動物胰腺B細(xì)胞來獲取，如人工糖尿病大鼠等。此方法有其缺點(diǎn)，一是不同動物之間的血糖難以處于同一水平，需經(jīng)常檢查血糖；化學(xué)藥物對T細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞功能產(chǎn)生的影響，會不可避免地在程度上干擾創(chuàng)傷**的過程。②直接選用基因突變型的遺傳性糖尿病大、小鼠或靈長類動物，這其中使用較多的是純合突變的db／db小鼠，它由于缺乏leptin受體而致肥胖，隨即成為胰島素抵抗型的糖尿病小鼠。在此小鼠身上人為造成創(chuàng)傷，即可建立起糖尿病潰瘍的研究模型。，這一模型的相關(guān)研究已證實(shí)，其創(chuàng)傷**困難的原因之一是炎癥細(xì)胞的遷徙受阻，所致炎癥反應(yīng)延遲，從而使得創(chuàng)口的收縮作用明顯下降，**更多地依賴于膠原沉積和再上皮化過程；同時(shí)，伴隨著各種生長因子釋放減少出現(xiàn)了基質(zhì)金屬蛋白酶的生成增多，而后者對組織修復(fù)有明顯的制約作用。除了db／db小鼠以外，另還有非肥胖型糖尿病小鼠和ob／0b小鼠、LA-cp大鼠等也都可用于此模型的建立和研究。

3．4壓力相關(guān)性傷口模型：壓力相關(guān)性傷口，在臨床上常見的為褥瘡，褥瘡作為住院患者常見的并發(fā)癥之一，其動物模型的研究已有不少的報(bào)道。過去常用于此模型的動物有大鼠、豚鼠、兔子、狗和豬等。而近年來，用小鼠建立這一實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷难芯恳仓饾u增多，曾有研究者在小鼠皮下埋置一不銹鋼片，再于皮膚表面用磁鐵產(chǎn)生吸引壓力來制備該模型。在此基礎(chǔ)上，還有人嘗試將金屬片埋置于肌肉下方，通過調(diào)控磁性壓力的方法來制作模擬患者深部褥瘡的傷口模型，但效果不甚理想。而Kemp-painen等用灰獵犬制作了一個(gè)壓力性傷口的動物模型，其方法是將一個(gè)短肢用的石膏管放置于狗一側(cè)下肢的內(nèi)踝部位，再往石膏管中加入量填塞材料。石膏管內(nèi)填塞的量和程度以及其持續(xù)放置的時(shí)間，被認(rèn)為可以決定狗內(nèi)踝部皮膚所受壓力損害的嚴(yán)重程度。對于這一模型的實(shí)用性和效果評價(jià)，尚有待進(jìn)一步的相關(guān)后續(xù)報(bào)道。

4、病理性瘢痕模型

病理性瘢痕(又稱異常瘢痕，abnormal scar)，包括增生性瘢痕和瘢痕疙瘩兩種。如前所述，創(chuàng)傷**研究一直以來面臨著的一個(gè)難題，就是缺乏理想的病理性瘢痕的動物模型。這些年來關(guān)于瘢痕動物模型的研究報(bào)道也有很多，但影響較廣泛、應(yīng)用較多的仍然是以下兩類。

4．1裸鼠瘢痕移植模型：這一模型早是在1985年由shetlar等報(bào)道，其方法是將人的瘢痕疙瘩組織移植到無胸腺裸鼠的背部皮下袋內(nèi)，對處于寄生狀態(tài)下的瘢痕組織進(jìn)行觀察。發(fā)現(xiàn)在移植后較長一段時(shí)間內(nèi)，植入瘢痕能保持其原有的活性和組織學(xué)特性。這一開創(chuàng)性的設(shè)計(jì)為瘢痕的實(shí)驗(yàn)研究開辟了一條新途徑。同時(shí)，這一模型也有其自身局限性。它并不是動物自身產(chǎn)生的瘢痕組織，且裸鼠缺乏胸腺和T**細(xì)胞，故不能模擬出生理環(huán)境下自體瘢痕發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的演變過程；其次，在維持的生長期后，這類瘢痕還是均以吸收消失而告終，這與人體瘢痕疙瘩的持續(xù)增生是明顯不同的。

4．2兔耳增生性瘢痕模型：兔耳增生性瘢痕模型，是在1997年由Morris等建立并報(bào)道的，他們認(rèn)為在兔耳腹側(cè)創(chuàng)面的**過程中，傷口可以出現(xiàn)類似于人體增生性瘢痕的組織增生塊。此后，國內(nèi)由李薈元等于1998年開展了兔耳瘢痕模型的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究，認(rèn)為免耳腹側(cè)創(chuàng)面**后確實(shí)可產(chǎn)生增生性瘢痕，并報(bào)道其發(fā)生率可高達(dá)83％，時(shí)間能持續(xù)超過100天，組織學(xué)檢查也顯示其結(jié)構(gòu)與人增生性瘢痕相似。，此模型已越來越多地用于增生性瘢痕的發(fā)病機(jī)制和**學(xué)的各種研究中，然而其產(chǎn)生的瘢痕塊的增生程度和持續(xù)時(shí)間與人體相比，仍存在著不小的差距。并且，模型制作的成功率也還有待進(jìn)一步提高。

5、現(xiàn)狀與展望