MPTP用于帕金森病小鼠模型制作^［5］

小鼠對MPTP的敏感性存在種系和年齡的差異。一般選10~12周齡，體重25~30g成年C57BL褐鼠，按體重30~40 mg／kg腹腔注射MPTP，連續(xù)7d。于第6~7次注射后出現(xiàn)暫時性(2~3h)軀干震額、豎毛、尾巴過伸、動作減少及爬桿試驗障礙。

MPTP用于舶金森病小國模型制作時的一些注意事項^［6］

a）小鼠種系對MPTP敏感性的影響 C57BL小鼠對MPTP為敏感，而CF-W小鼠、FVB／N小鼠和Balb/C小鼠對MPTP的敏感性較C57BL小鼠稍差，CF-1和CD-1對MPTP的敏感性差。較常用的小鼠為C57BL/6小鼠

b）鼠齡對MPTP敏感性的影響 老齡鼠較青年鼠對MPTP更為敏感，這種敏感性的差異不僅表現(xiàn)在順處理后的老齡鼠能夠呈現(xiàn)更為明顯的黑質多巴胺能神經元數(shù)目的減少，而且還能在順處理后的老齡鼠身上觀察到藍斑區(qū)腎上腺紊能神經元數(shù)目的減少以及較典型的帕金森病行為學方面的改變

其他建立模型的方法

利血平模型 利血乎主要可以通過抑制去甲腎上腺素能神經元末梢的再攝取功能，使囊泡內貯存的多巴胺(DA)及其他的兒茶酚胺類遞質耗竭。將雄性Wistar大鼠(體重280—300g)腹腔內注射劑量的利血平后可使其出現(xiàn)骨傷肌慢硬、震顫、身體屈曲、運動過少以及其他的一些運動癥狀。神經化學分析發(fā)現(xiàn)大鼠紋狀體內DA和其他單胺類遞質的含量明顯減少。因此．這類模型在程度上模擬了PD的臨床表現(xiàn)和神經化學改變。但它存在明顯的不足：一是藥物注射造成的運動障礙在不同時間和不同個體之間變異性較大；二是利血乎同時引起了多種遞質釋放并且無法造成類似PD的病理改變。因此該模型的應用只局限于探索藥物影響肌僵狀態(tài)的實驗中，對其他的運動癥狀的研究現(xiàn)已很少應用。

Fe³⁺模型 1991年Ben-Shachar在雄性SD大鼠(250~300g)單側黑質內注射Fe3+三周后可使其出現(xiàn)明顯的運動行為改變，表現(xiàn)為在新環(huán)境中自主運動減少，短暫的僵直癥狀及自發(fā)的同測旋轉行為。安菲它明(AMPH)可使這種同測旋轉行為加強。神經化學研究發(fā)現(xiàn)同側紋狀體DA含量平均減少95％，并且其代謝產物3，4—二羥基***(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量也明顯減低。組織病理學證實酪氨酸經化酶(TH)免疫染色陽性細胞大量減少，同時膠質細胞增生活躍。

機械損傷模型 研究發(fā)現(xiàn)機械損傷內側前肋束(MF可以造成黑質內的DA能神經元進行性死亡。已經建立的造模方法有MFB獨突切斷術和中腦半切術，尤以前者應用較多。MFB切斷術損傷模型的建立需要在大鼠腦立體定位儀上準確定住后，用特制的Scouten電線刀深入到MFB所在的部位將其切斷。Brechne用此方法切斷雄性CFHB大鼠(150～180g)的MFB后，分別于第1，2，4，6，10，16周計數(shù)DA能神經元的存活數(shù)目，發(fā)現(xiàn)約28％的黑質(SN)神經元在一周左右死亡，10周后約70％的細胞死亡。平均SN神經元存活數(shù)是29％。逆行追蹤顯示MFB切斷成功率為92％～99％?？梢?，用該方法造模有如下優(yōu)點：①成功率高，較為經濟。②黑質DA能神經元呈現(xiàn)漸進性死亡，可以模擬PD病理變化的全過程，對于研究神經元的再生和PD的預防有的意義。缺點是切斷術后短時間內，損傷的程度不穩(wěn)定。

帕金森病小鼠模型行為學改變的定量觀察

1）爬桿試驗

2）懸掛實驗

3）游泳實驗

以上幾種定量觀察法為帕金森病小鼠模型行為學的研究提供了一些較為準確和客觀的方法，同時也提高了整個實驗的客觀性。

上海達為科生物科技有限公司在動物造模和實驗方面造詣頗深，技術值得信賴，能提供專業(yè)的實驗操作和一體式服務。