智啟醫(yī)學(xué)新維度
服務(wù)電話: 180-1784-7121(微信同號(hào))
PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain)
PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain) 又稱(chēng)過(guò)碘酸雪夫染色、糖原染色,在組織學(xué)上,主要用來(lái)檢測(cè)組織中的糖類(lèi)。過(guò)碘酸把糖類(lèi)相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,再與Schiff試劑的無(wú)色品紅結(jié)合而呈紫紅色。
隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應(yīng)用的范圍更加廣泛,如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些腫瘤的診斷等。
固定液
Carnoy固定液: 純酒精60 ml 冰醋酸10ml氯仿 30ml,也可以選用75%酒精.
液配制
1) 過(guò)碘酸酒清夜配法:
過(guò)碘酸(HIO .2H O) 0.4g 95%酒精 35ml M/5醋酸鈉(2.72g+蒸餾水100ml) 5ml蒸餾水10ml;
保存于冰箱內(nèi),用棕色瓶,可用兩周.
2)Schiff氏液:
0.5克堿性品紅加入100毫升蒸餾水中,時(shí)時(shí)搖動(dòng)三角瓶5分鐘,使之充分溶解.冷卻至50℃后過(guò)濾加入10毫升1N鹽酸.冷卻至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸鈉,在室溫中至少靜置24小時(shí),然后密封冰箱保存.
3) Schiff氏酒精液配置 Schiff氏液 11.5ml 1N HCI 0.5ml 純酒精 23ml
4) 亞硫酸水 1%偏重亞硫酸鈉10ml 1N HCI 10ml 蒸餾水 180ml的樹(shù)膠溶解。
5)哈瑞或邁耶蘇木精
染色步驟
1. 石蠟切片脫蠟至水(細(xì)胞涂片,冰凍切片直接水洗)
2. 蒸餾水洗
3. 過(guò)碘酸酒清夜10min
4. 自來(lái)水沖洗10min
5. Schiff氏液10min
6. 流水沖洗5min
7.用哈瑞蘇木精或邁耶蘇木精染核3min(細(xì)胞核染色過(guò)深可用鹽酸酒精分化)
8. 流水沖洗5min
9. 常規(guī)脫水、透明、封固
結(jié)果
PAS陽(yáng)性為紅色,細(xì)胞核藍(lán)色。
注意事項(xiàng)
1、高碘酸溶液為透明溶液,長(zhǎng)時(shí)間染色如果沒(méi)有帶入雜質(zhì)的話此溶液一直是透明的,所以無(wú)法從常規(guī)的顏色辨別高碘酸的好壞,只有定期更換,根據(jù)標(biāo)本的多少1~2月更換一次。
2、雪夫試劑要放入冰箱保存,臨用前半小時(shí)取出恢復(fù)至室溫,用后又倒回原瓶?jī)?nèi)放冰箱保存;雪夫試劑出現(xiàn)淡紅色就不能繼續(xù)使用了。
上海達(dá)為科生物科技有限公司,主營(yíng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)、服務(wù)、動(dòng)物模型構(gòu)建、細(xì)胞株、elisa試劑盒等,歡迎廣大科研愛(ài)好者前來(lái)咨詢(xún)選購(gòu)!